[发明专利]一种荷花无菌苗获取的构建方法有效
申请号: | 201810123533.7 | 申请日: | 2018-02-07 |
公开(公告)号: | CN108207633B | 公开(公告)日: | 2021-07-16 |
发明(设计)人: | 徐迎春;王华;金奇江;王彦杰 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学;南京花漫溪农业科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 徐冬涛 |
地址: | 210043 江苏省南京市栖霞区八卦洲街道江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种荷花无菌苗获取的构建方法,属于植物组织培养技术领域。本发明包括以下步骤:(1)灭菌:选取“广昌白莲”的圆形饱满的莲子在无菌操作台上用75%的酒精和3%次氯酸钠消毒备用;(2)破壳浸泡:用修枝剪破壳,将已经破壳的荷花种子整平浸泡在无菌水中7h以上,种子吸水膨胀,种壳同子叶分离;(3)剥除种壳:把种子外的种皮剥除,将无种壳的种子在75%的酒精中浸泡2min消毒,取出种子晾干。(4)获得种胚:待种子表面的水分蒸发后用手将已吸水膨胀的种子捏开,用镊子将种胚取下。(5)初选接种:对胚进行初选,将初选合格的胚接种在MS培养基上。本发明显著提高了莲子的利用率、成活率,并且把污染率、损耗率降至最低。 | ||
搜索关键词: | 一种 荷花 菌苗 获取 构建 方法 | ||
【主权项】:
1.一种荷花无菌苗获取的构建方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)灭菌:选取“广昌白莲”的圆形饱满的莲子在无菌操作台上用75%的酒精和3%次氯酸钠消毒灭菌备用;(2)破壳浸泡:用修枝剪破壳,破壳部位在荷花种子萌发孔正对面的种蒂处,将已经破壳的荷花种子整平浸泡在无菌水中7h以上,浸泡完成后,种子吸水膨胀,种壳同子叶分离;(3)剥除种壳:在超净工作台上将浸泡用的容器中的水倒出,用无菌水洗一次种子,把浸泡时产生的浑浊的水洗净,把种子外的种皮在不破坏子叶完整性的前提下剥除,将无种壳的种子在75%的酒精中浸泡1‑5min消毒,取出种子晾干待用;(4)获得种胚:待种子表面的水分蒸发后用手将已吸水膨胀的种子捏开,用镊子将种胚取下;(5)初选接种:对胚进行初选,将初选合格的胚接种在MS培养基上,培养无菌苗,所述培养基配方如下:MS+8g/L琼脂+30g/L蔗糖。
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