[发明专利]一种脂肪间充质干细胞的分离培养方法和无血清培养基在审
| 申请号： | 201810125083.5 | 申请日： | 2018-02-07 |
| 公开（公告）号： | CN108300690A | 公开（公告）日： | 2018-07-20 |
| 发明（设计）人： | 段海峰 | 申请（专利权）人： | 北京汇智驰康生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 北京知呱呱知识产权代理有限公司 11577 | 代理人： | 李芙蓉;孙进华 |
| 地址： | 100070 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种脂肪间充质干细胞的分离培养方法和无血清培养基，属于生物细胞分离技术领域，采用的技术方案是一种脂肪间充质干细胞的无血清培养基，所述无血清培养基为基础培养基中加入抗坏血酸、碱性成纤维细胞生长因子、血小板衍生因子和人血白蛋白，无血清干细胞培养基中组分浓度为抗坏血酸60‑80mg/L，碱性成纤维细胞生长因子10‑30μg/L、血小板衍生因子10‑30μg/L和人血白蛋白4‑8g/L。优点是分离培养方法，方法简单，能高效、快速分离脂肪间充质干细胞，所得细胞数量大，减少了样本用量；提供的无血清培养基组分科学，配比优良，利于脂肪间充质干细胞的生长，大大提高了脂肪间充质干细胞增殖率。 | ||
| 搜索关键词： | 脂肪间充质干细胞 无血清培养基 分离培养 碱性成纤维细胞生长因子 血小板衍生因子 人血白蛋白 抗坏血酸 无血清干细胞培养基 分离技术领域 基础培养基 无血清培养 快速分离 生物细胞 配比 样本 细胞 生长 | ||
【主权项】：
1.一种脂肪间充质干细胞的分离培养方法，其特征在于，所述分离培养方法包括以下步骤：①分离收集脂肪组织并清洗，向脂肪组织中加入混合消化酶溶液，37℃消化30‑90min，加入培养基终止消化，吹打均匀后，1500‑3000rpm离心10‑30min，收集底部沉淀，得原代脂肪间充质干细胞，所述混合消化酶溶液为溶有胰蛋白酶和I型胶原酶的PBS缓冲溶液；②配制无血清培养基:向基础培养基中加入抗坏血酸、碱性成纤维细胞生长因子、血小板衍生因子和人血白蛋白，配制成无血清培养基；③将原代脂肪间充质干细胞以步骤②的无血清培养基重悬，37℃、5％CO2培养箱中培养。
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