[发明专利]坦布苏病毒非结构蛋白NS4B截短蛋白的表达方法及其产品和应用有效
| 申请号： | 201810133024.2 | 申请日： | 2018-02-09 |
| 公开（公告）号： | CN108484737B | 公开（公告）日： | 2021-04-23 |
| 发明（设计）人： | 陈舜;姜博文;张伟;程安春;汪铭书 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C07K14/18 | 分类号： | C07K14/18;C12N15/70;C07K16/10;G01N33/569 |
| 代理公司： | 成都玖和知识产权代理事务所(普通合伙) 51238 | 代理人： | 胡琳梅 |
| 地址： | 611100 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种坦布苏病毒非结构蛋白NS4B截短蛋白的表达方法及其产品和应用，通过将非结构蛋白NS4B截短，然后进行重组表达，截短后容易表达，且表达量高；表达中通过优化表达条件使重组蛋白在包涵体内表达，便于纯化，纯化的蛋白具有免疫原性，免疫动物后能够获得效价高的多抗血清，并且制得的抗体灵敏度高，可用于坦布苏病毒非结构蛋白NS4B的检测以及并检测坦布苏病毒在感染不同时期非结构蛋白NS4B在细胞内的定位变化情况，对坦布苏病毒的研究具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 坦布苏 病毒 结构 蛋白 ns4b 表达 方法 及其 产品 应用 | ||
【主权项】：
1.坦布苏病毒非结构蛋白NS4B截短蛋白的表达方法，其特征在于，具体步骤如下：1)以感染坦布苏病毒的鸭胚成纤维细胞提取的RNA为模板，反转录合成cDNA，然后以SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示序列为引物进行PCR扩增，扩增获得NS4B截短基因；2)将步骤1)扩增获得的NS4B截短基因连入表达载体获得重组表达载体，然后将重组表达载体转化宿主表达菌，获得工程菌，然后将工程菌用IPTG诱导表达，经纯化获得坦布苏病毒非结构蛋白NS4B截短蛋白。
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