[发明专利]用研磨法制备磁性MOF材料并用于酶的固定

摘要

本发明涉及一种用研磨法制备磁性MOF材料并用于酶的固定。以氧化锌和2‑甲基咪唑以及Fe3O4磁性纳米粒子为原料一步法简单快速合成磁性的Fe3O4@ZIF‑8材料。这种新型制备方法的优点在于它安全快速并且无污染，将该材料成功用于脂肪酶的固定，将脂肪酶进行固定后，酶活性保持而稳定性大大提高，材料具有磁性，容易分离和实现重复使用。且该材料也同样适用胰蛋白酶的固定，说明Fe3O4@ZIF‑8材料对酶的固定具有普适性。游离酶经过固定化后成为一种较为理想的催化剂，对于现代工业来说，有很好的应用前景。

主权项

1.用研磨法制备磁性MOF材料并用于酶的固定，其步骤是：a. 磁性MOF材料（Fe3O4@ZIF‑8）的制备在研钵中加入60mg的Fe3O4,120mg的ZnO以及242mg的2‑甲基咪唑（HMeIM），在研钵中研磨10min,收集固体颗粒（Fe3O4@ZIF‑8），用超纯水洗涤固体颗粒5‑6次，洗涤后的固体颗粒接近磁铁，实现磁性回收，带磁性的固体颗粒通过60℃真空干燥12h；b. 酶的固定称取酶溶于水，在冷冻离心机4℃下12000 rpm离心15 min，取上清液冻干，放在4℃备用，称取100mg的冻干的酶溶于100ml 、10 mM 、pH=7.4的磷酸的缓冲液中，取缓冲液5ml,加入5mg的Fe3O4@ZIF‑8材料，使用涡旋机将固体颗粒和溶液混合均匀，并在摇床中25℃下过夜；酶的上载量通过Beford法检测为每毫克固体颗粒能够固定28微克的酶，使用磁铁实现磁性回收该固定化酶，并用pH=7.4,10 mM磷酸的缓冲液洗涤材料3‑4次,以除去Fe3O4@ZIF‑8材料上物理吸附的酶和溶液中未固定的游离酶。