[发明专利]纳米自组装短肽三维细胞培养技术在病毒分离培养中的应用在审
| 申请号： | 201810136594.7 | 申请日： | 2018-02-09 |
| 公开（公告）号： | CN108315307A | 公开（公告）日： | 2018-07-24 |
| 发明（设计）人： | 宋鸿;敖弟书 | 申请（专利权）人： | 遵义医学院 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;C12N5/0783;C12N5/071;C12N5/09;C12R1/93 |
| 代理公司： | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人： | 商小川 |
| 地址： | 563003 贵*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用纳米自组装短肽三维细胞培养分离培养病毒的方法，其特征在于：其包含以下步骤：(1)三维培养敏感细胞：二维复苏培养敏感细胞，取生长状况良好单层培养细胞，用0.25％胰酶消化，将收集的细胞用10％蔗糖洗涤，再用10％蔗糖制备成细胞悬液，在细胞培养板中加入相应完全培养液，肽溶液与细胞悬液充分混合后,缓慢加入培养液中使其集中在中央，待凝胶完全凝固后放入CO2培养箱中，隔日换液；(2)上述步骤中制得的三维培养模型，接种目标病毒,细胞培养板中每孔接种目标毒感染三维细胞，置37℃培养。 | ||
| 搜索关键词： | 培养液 三维细胞培养 细胞培养板 自组装短肽 敏感细胞 三维培养 细胞悬液 蔗糖 接种 单层培养细胞 细胞 病毒分离 充分混合 分离培养 目标病毒 生长状况 胰酶消化 肽溶液 二维 放入 换液 凝胶 制备 洗涤 凝固 三维 病毒 复苏 感染 应用 | ||
【主权项】：
1.一种基于纳米自组装短肽细胞三维培养支架培养病毒的方法，其特征在于包含以下步骤：(1)三维培养易感细胞：二维复苏培养易感细胞，取生长状况良好单层培养细胞，用0.25％胰酶消化，吹打成细胞悬液，将收集的细胞用10％蔗糖洗涤，再用10％蔗糖制备成细胞悬液，在细胞培养板中加入相应完全培养液，肽溶液与细胞悬液充分混合后,加入培养液中使其集中在中央，5～10min待凝胶完全凝固后放入37℃ CO2培养箱中，30min后更换培养液一次；次日再更换细胞培养液一次，以后隔日换液；(2)目标病毒感染细胞三维模型的建立：上述步骤中制得的三维培养模型，接种目标病毒,细胞培养板中每孔接种目标病毒感染三维细胞，置37℃培养。
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