[发明专利]一种龟背竹组织培养的方法

摘要

本发明提供一种龟背竹组织培养的方法，涉及植物培育繁殖技术领域，包括以下步骤：(一)外植体的预处理、(二)培养基的培养、(三)大棚炼苗、(四)生根苗移栽；本发明龟背竹组织培养的方法在含有不同激素配比的MS培养基上诱导杉木的愈伤组织，通过诱导培养基、增殖培养基以及生根培养基的培养，各培养基提供外植体在生根壮苗期间所需的因子，能够提供生根的良好条件，促进苗健康茁壮，其培养方法取材方便，成本低、操作简单，扩繁速度快，繁殖系数高，具有良好的经济效益和生态效益，适用于规模化生产。

主权项

1.一种龟背竹组织培养的方法，其特征在于，包括如下步骤：(一)外植体的预处理：剪取龟背竹的茎顶或者腋芽作为外植体，将外植体剪成4‑6cm的条状物，然后用70％酒精将外植体浸泡3‑5s，然后置于1‑1.5％次氯酸钠溶液中浸泡15‑30min，浸泡过程不断进行振荡，浸泡完成后用无菌水将外植体冲洗4‑6次，然后放置于无菌接种盘吹干其表面水分，切去叶片以及旧的切口，切成2‑2.5cm带2‑3个芽的茎段，将带芽茎段置于自来水下冲洗30min，用滤纸吸干带芽茎段备用；(二)培养基的培养：(1)诱导培养：将上述步骤获得的带芽茎段先接种到诱导培养基上，黑暗条件下培养5‑10天，然后按光照和黑暗时间比为2:1交替进行诱导培养，诱导新芽长高至4‑5cm后，将新芽的叶片切去，切成2‑3cm的茎段；所述诱导培养基含有含有MS+1.5mg/L KT+0.5mg/L 6‑BA+0.1mg/L IBA+4.5g/L琼脂+30g/L蔗糖；(2)增殖培养：将步骤(1)培养后处理得到的茎段接种到增殖培养基上培养35‑40天后，将新芽转到新的增殖培养基培养，增殖倍数达到3‑4倍；所述增殖培养基的成分为：MS+1.0mg/L KT+0.2mg/L 6‑BA+0.5mg/L NAA+3.5g/L琼脂+25g/L蔗糖；(3)生根培养：将经步骤(2)增殖培养得到的丛芽切除其多余的侧面芽或不定芽，按照高度为1.5‑3cm将具有单芽的小枝剪切下来，然后将剪切后的小枝放到生根培养基进行生根培养，培养20‑25天后即可出瓶炼苗；所述生根培养基的成分为：1/2改良MS+0.1‑1mgLIBA+1.5‑2.0mg/L生根粉+4‑4.5g/L琼脂+25‑30g/L白糖；(三)大棚炼苗：用镊子将小苗从培养器皿中取出，用自来水将小苗根部的培养基洗净，然后种植到培养土苗盘里并喷淋定根水，待叶面干后，喷施800‑1000倍液的百菌清，7‑15天后喷施20‑30倍的沼液，在大棚内培育3‑5个月后进行移栽。