[发明专利]一种重组传染性脓疱溶瘤病毒及其制备方法与应用有效
申请号: | 201810142968.6 | 申请日: | 2018-02-11 |
公开(公告)号: | CN108220251B | 公开(公告)日: | 2022-03-04 |
发明(设计)人: | 郝文波;罗树红;陈达香;陈瑜 | 申请(专利权)人: | 南方医科大学 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C12N15/62;C12N15/66;C07K19/00;A61K48/00;A61K38/17;A61K35/768;A61P35/00 |
代理公司: | 北京盛询知识产权代理有限公司 11901 | 代理人: | 张海青 |
地址: | 510515 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种ORFV溶瘤病毒及其制备方法和应用,本发明的重组传染性脓疱溶瘤病毒的制备方法,包括以下步骤:(1)overlap PCR扩增权利要求7所述蛋白的基因p53;(2)连接到pSPV‑EGFP载体,插入p53基因得到重组质粒p53‑pSPV‑EGFP,随后再插入ORFV132基因的左右侧,构建穿梭质粒ORFV132LF‑p53‑pSPV‑EGFP‑ORFV132RF;(3)将其转化宿主菌TOP10,获得阳性重组菌,(4)转染OFTu细胞后荧光鉴定p53和EGFP的融合表达;制得纯化的重组传染性脓疱溶瘤病毒。(5)制得的重组传染性脓疱溶瘤病毒能够在OFTu和多种肿瘤细胞中复制增殖,并有效抑制多种肿瘤细胞生长。本发明在显微镜中即可观察,易于操作,方便快捷,大大缩短了筛选时间。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 传染性 脓疱溶瘤 病毒 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种重组传染性脓疱溶瘤病毒,其特征在于:所述重组溶瘤病毒为携带P53‑EGFP融合蛋白基因的溶瘤病毒,所述融合蛋白包括P53蛋白和EGFP蛋白。
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