[发明专利]基于CRISPR/Cas9的植物高效同源重组方法在审
申请号: | 201810146653.9 | 申请日: | 2018-02-12 |
公开(公告)号: | CN108486145A | 公开(公告)日: | 2018-09-04 |
发明(设计)人: | 胡赞民;范成明;李冬冬;王晓波;陈宇红;袁静;韩方普;张彦峰 | 申请(专利权)人: | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00;A01H6/46;A01H6/20 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;黄爽 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供一种基于CRISPR/Cas9的植物高效同源重组方法,根据待编辑的植物靶基因,分别构建基因编辑载体和基因同源重组载体,然后,用两种载体共同转化植物,获得转基因植株。其中,所述基因编辑载体至少包含Cas9表达框和gRNA表达元件,所述基因同源重组载体至少包含来源于菜豆黄矮病毒的复制子元件、同源左臂、待敲入基因和同源右臂。本发明将靶标供体片段和基因编辑元件分别构建在两个载体上,减少了复制子的负荷,有效增加了靶标同源片段的拷贝数,在有效地对染色体进行编辑的基础上,增加了靶标序列的拷贝数,将极大地提高同源重组的效率。 | ||
搜索关键词: | 同源重组 靶标 基因 基因同源重组 复制子 拷贝数 构建 菜豆 转基因植株 同源片段 转化植物 靶基因 表达框 有效地 染色体 供体 左臂 右臂 同源 病毒 | ||
【主权项】:
1.基于CRISPR/Cas9技术开发的一种用于植物基因编辑的载体,其特征在于,包括基因编辑载体和基因同源重组载体;其中,所述基因编辑载体至少包含Cas9表达框和gRNA表达元件,所述基因同源重组载体至少包含来源于菜豆黄矮病毒的复制子元件、同源左臂、待敲入基因和同源右臂。
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