[发明专利]一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法

摘要

本发明公开了一种棕榈酰三肽‑1的液相合成方法，通过对棕榈酰三肽‑1分段合成，分别合成了棕榈酰三肽‑1序列中的二肽片段H‑His‑Lys(Z)‑OBzl和另外一个片段Pal‑Gly‑OH，然后这两个片段以活化酯的方法合成了棕榈酰三肽片段，再通过氢化反应得到终产品棕榈酰三肽‑1。本发明克服了固相反应中每一步必须使用保护氨基酸、溶剂种类多、试剂明显过量及溶剂难回收的缺点，具有合成方法简单、产品成本低、对环境更为绿色化等优点，且能够大规模生产，可以工业化生产棕榈酰三肽‑1。

主权项

1.一种棕榈酰三肽‑1的液相合成方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)合成Pal‑Gly‑OH：将甘氨酸与叔丁醇按质量‑体积比为1g：(3～6)mL混合均匀，加入氢氧化钾或氢氧化钠水溶液，搅拌至澄清；降温至0～5℃,滴加棕榈酰氯和氢氧化钾或氢氧化钠水溶液，保持反应体系的pH在7.5～9.5之间，温度控制在5℃以下；甘氨酸与氢氧化钾或氢氧化钠、棕榈酰氯的摩尔比为1:(2.0～2.5):(1.0～1.2)；甘氨酸与水的质量‑体积比为1g:(10～15)mL；滴加完毕撤去冰浴，自然升温至室温搅拌2～3个小时，用盐酸溶液调pH至2～3，过滤，烘干，得到Pal‑Gly‑OH粗品，粗品用乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇或正庚烷打浆，即得纯品Pal‑Gly‑OH；(2)合成Pal‑Gly‑ONb或Pal‑Gly‑OSU：将步骤(1)获得的Pal‑Gly‑OH和DMF按质量体‑积比为1g：(3～6)mL混合均匀，加入HONb或HOSU，搅拌至溶解，降温至0℃，分批加入EDCI，Pal‑Gly‑OH、HONb或HOSU和EDCI的摩尔比为1:(1.0～1.2):(1.1～1.3)；加料完毕撤去水浴升温至室温，搅拌6～10个小时；(3)合成Boc‑His(Trt)‑Lys(Z)‑OBzl：将H‑Lys(Z)‑OBzl.HCl与二氯甲烷按质量体‑积比为1g:(8～10)mL混合均匀，分批加入碳酸钠，然后加入Boc‑His(Trt)‑OH，搅拌10分钟，降温至0℃，分批加入EDCI，H‑Lys(Z)‑OBzl.HCl、碳酸钠、Boc‑His(Trt)‑OH和EDCI的摩尔比为1:(1.0～1.1):(1.0～1.1):(1.1～1.3)；加料完毕，撤去水浴升温至室温，搅拌4‑6小时，反应液分别用水、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水洗，浓缩掉一部分二氯甲烷得到Boc‑His(Trt)‑Lys(Z)‑OBzl的二氯甲烷溶液；(4)合成H‑His‑Lys(Z)‑OBzl：将步骤(3)获得的Boc‑His(Trt)‑Lys(Z)‑OBzl的二氯甲烷溶液，降温至0℃，滴加含水10％的三氟乙酸溶液，H‑His(Trt)‑Lys(Z)‑OBzl与三氟乙酸的摩尔比为1.0:(15～20)，滴加完毕，撤去水浴升温至室温，搅拌10～15小时；浓缩掉大部分的二氯甲烷，加水，搅拌，过滤，除去生成的副产物三苯甲醇；滤液转移到反应瓶并降温至0℃，用氢氧化钠、碳酸钠或碳酸氢钠溶液调pH至6.0～8.0之间，过滤，得到H‑His‑Lys(Z)‑OBzl的湿品；(5)合成Pal‑Gly‑His‑Lys(Z)‑OBzl：向步骤(2)的反应液中加入碳酸氢钠，控制温度低于20℃，分批加入步骤(4)所制得的湿品H‑His‑Lys(Z)‑OBzl，H‑His‑Lys(Z)‑OBzl、碳酸氢钠和Pal‑Gly‑ONb或Pal‑Gly‑OSU的摩尔比为1.0:(1.1～1.3):(1.0～1.2)，加料完毕室温搅拌2～3个小时，加水，搅拌，过滤，得到Pal‑Gly‑His‑Lys(Z)‑OBzl的湿粗品，烘干，选用二氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯或乙腈打浆，得到精品Pal‑Gly‑His‑Lys(Z)‑OBzl；(6)合成Pal‑Gly‑His‑Lys‑OH：将Pal‑Gly‑His‑Lys(Z)‑OBzl与甲醇、乙醇或乙酸按质量‑体积比1g：(8～10)mL混合均匀，氮气保护下加入含量为5％的湿Pd/C，Pal‑Gly‑His‑Lys(Z)‑OBzl与湿Pd/C的质量比为1.0:(0.05～0.10)，氮气置换三次，氢气置换三次，室温下搅拌16～20小时，过滤除去Pd/C，滤液浓缩至起始原料Pal‑Gly‑His‑Lys(Z)‑OBzl与残留液体的质量体积比为1g:(2～4)mL，加乙腈、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯或甲醇打浆，过滤，烘干，即得Pal‑Gly‑His‑Lys‑OH精品。