[发明专利]一种铂-金纳米球壳包覆的雷公藤甲素脂质体及其制备方法

摘要

一种铂‑金纳米球壳包覆的雷公藤甲素脂质体，它是在雷公藤甲素脂质体的表面控制生长形成金纳米花结构，然后进一步在其表面调控生长一层铂球壳结构的纳米载药脂质体；其制备方法主要是将谷胱甘肽修饰的雷公藤甲素脂质体与金纳米粒子以一定比例混合孵育，控制得到结合量不同的金纳米粒子修饰的雷公藤甲素脂质体；然后通过二次结晶生长获得金纳米花包覆的雷公藤甲素脂质体；进一步加入一定比例的氯铂酸和还原剂进行孵育，最终得到铂‑金纳米球壳包覆的雷公藤甲素脂质体。本发明所制备的铂‑金纳米球壳包覆的雷公藤甲素脂质体能够有效的降低药物对正常组织的毒副作用、避免肿瘤的多药耐药现象的发生、具有显著的杀伤肿瘤细胞能力。

主权项

1.一种铂‑金纳米球壳包覆的雷公藤甲素脂质体的制备方法，所述铂‑金纳米球壳包覆的雷公藤甲素脂质体是一种在雷公藤甲素脂质体的表面控制生长形成金纳米花结构，然后进一步在其表面调控生长一层铂球壳结构的纳米载药脂质体，其特征在于：(1)制备聚乙二醇修饰雷公藤甲素脂质体①按雷公藤甲素：胆固醇：大豆卵磷脂的质量比＝1:2～4:20～30的比例，将雷公藤甲素、胆固醇和大豆卵磷脂溶解于无水乙醇中，使每毫升无水乙醇中含上述三种溶质质量总和为9.2～14mg，通过磁力搅拌得到均一的类脂溶液；②按每10mL PBS缓冲液加入4～6mg聚乙二醇的比例，将聚乙二醇在pH 6～7的PBS缓冲液中充分溶解得到水化介质；③在磁力搅拌下将步骤①得到的类脂溶液缓慢匀速滴入到35～45℃的步骤②得到的水化介质中，并且控制类脂溶液：水化介质的体积比为1:1.5～2.5，得到雷公藤甲素脂质体悬液；④将步骤③得到的雷公藤甲素脂质体悬液置于摇床孵育，18～23℃，60～80r/min，1～3h，除去混悬液中的无水乙醇，得到聚乙二醇修饰的雷公藤甲素脂质体；(2)制备金纳米花包覆的雷公藤甲素脂质体①按每毫升去离子水中含5～10mg谷胱甘肽的比例得到谷胱甘肽溶液，在磁力搅拌下，将谷胱甘肽溶液逐滴加入上述得到的聚乙二醇修饰的雷公藤甲素脂质体中，控制谷胱甘肽与脂质体的体积比为1:9～11，混合溶液在室温条件下孵育3～5h，得到谷胱甘肽修饰的脂质体；②将浓度为200～230mM的硼氢化钠溶液和浓度为1～2mM的氯化金溶液在冰浴条件下静置5min，迅速将硼氢化钠滴入氯化金溶液中，使每毫升氯化金溶液中含有10～30μL硼氢化钠溶液，剧烈摇晃，反应1～3min后，得到粒径在5～10nm的金纳米粒子胶体溶液，常温避光放置30min待用；③将步骤②得到的金纳米粒子胶体溶液与谷胱甘肽脂质体按体积比1:0.5～3的比例混合，并在18～23℃，60～80r/min条件下避光孵育5～10h，得到结合不同量金纳米粒子的雷公藤甲素脂质体，以此调控金纳米花的形貌；④将浓度为0.5～1mM的氯化金溶液与步骤③得到的溶液按体积比1:0.5～1混合，常温静置5～15min，再按混合溶液与盐酸羟胺的体积比为150～200:3～7的比例，以每秒10μL的速度向混合溶液中加入浓度为100mM的盐酸羟胺进行还原，边加边缓慢摇晃，在18～23℃，60～80r/min条件下孵育10～20h，至溶液颜色变为蓝色，即得到金纳米花包覆的雷公藤甲素脂质体；(3)制备铂‑金球壳包覆的雷公藤甲素脂质体将浓度为1～3mM的氯铂酸溶液与上述得到的金纳米花包覆的雷公藤甲素脂质体按照体积比0.1～0.5:1混合，常温静置5～15min，再按混合溶液与抗坏血酸的体积比为27.5～37.5:1～2的比例，向混合溶液加入浓度为30～70mM的抗坏血酸控制铂的还原和生长过程，在18～23℃，60～80r/min条件下避光孵育5～10h，最终控制得到载铂量不同的铂‑金纳米球壳包覆的雷公藤甲素脂质体。