[发明专利]一种鉴定毛栓孔菌S0301中同核体菌株的方法有效
申请号: | 201810175037.6 | 申请日: | 2018-03-02 |
公开(公告)号: | CN108486269B | 公开(公告)日: | 2021-08-20 |
发明(设计)人: | 严金平;伍圆圆;张宇;杨徐磊;伊日布斯;杨恩 | 申请(专利权)人: | 昆明理工大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
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地址: | 650093 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明公开了一种鉴定毛栓孔菌S0301中同核体菌株的方法;该方法通过交配型基因引物对原生质体再生技术得到的再生单菌进行PCR验证,扩增出一种交配型基因的为同核体菌株,交配型基因引物包括用于检测交配型基因位点b1的特异性引物对TM1‑1F/TM1‑1R和/或TM1‑2F/TM1‑2R,用于检测交配型基因位点b2的特异性引物对TM2‑1F/TM2‑1R和/或TM2‑2F/TM2‑2R;同时与通过油镜下观察菌丝显微特征锁状联合的有、无的传统方法相比,运用本发明所提供的方法对同核体的识别与锁状联合观察结果完全相符,且检查结果特异性强,稳定可靠,能准确快速的区分不同类型的同核体菌株。 | ||
搜索关键词: | 一种 鉴定 毛栓孔菌 s0301 菌株 方法 | ||
【主权项】:
1.一种鉴定毛栓孔菌S0301中同核体菌株的方法,其特征在于:通过交配型基因引物对原生质体再生技术得到的再生单菌进行PCR验证,扩增出一种交配型基因的为同核体菌株,交配型基因引物包括用于检测交配型基因位点b1的特异性引物对TM1‑1F/ TM1‑1R和/或TM1‑2F/ TM1‑2R,用于检测交配型基因位点b2的特异性引物对TM2‑1F/ TM2‑1R和/或TM2‑2F/ TM2‑2R;所述的针对b1位点的TM1‑1F/ TM1‑1R和TM1‑2F/ TM1‑2R特异引物对中:TM1‑1F的核苷酸序列为5’‑TCGTTGCTCTCGTGTTTGCT‑3’;TM1‑1R的核苷酸序列为5’‑TTTGGTATCCGCGCTTGAAT‑3’;TM1‑2F的核苷酸序列为5’‑AGGCTCAAAGGGTGGATTCAA‑3’;TM1‑2R的核苷酸序列为5’‑GCTCTGGTCCGTAACGATAGG‑3’;所述的针对b2位点的TM2‑1F/ TM2‑1R和TM2‑2F/ TM2‑2R特异引物对中:TM2‑2F的核苷酸序列为5’‑ TTCCCGCCCTCTACAATACG‑3’;TM2‑1R的核苷酸序列为5’‑ TGCCCAGAACAAACCAAAAC‑3’;TM2‑2F的核苷酸序列为5’‑ACTTGGTCGTCTTTGTGTTG‑3; TM2‑2R的核苷酸序列为5’‑ ATCTTTGGAGGCCTTGTTAC‑3’。
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