[发明专利]一种包膜病毒颗粒的分离方法及组合物

摘要

本发明公开了一种包膜病毒颗粒的分离方法及组合物，其包括将病毒液进行次序可互换的离子交换层析和羟基磷灰石层析。本发明方法的有益效果在于：对病毒液的前处理工艺要求低，不会对病毒颗粒造成二次破坏，可以在不调整工艺条件的情况下，处理各种培养基质培养得到的病毒液，处理量大，处理成本低；提高了病毒颗粒的结构均一性，通过离子交换层析和羟基磷灰石层析，可将目标病毒颗粒与分子量接近但结构异常的包膜病毒颗粒有效分离。

主权项

1.一种用于分离包膜病毒颗粒的方法，包括将病毒液进行阴离子交换层析和羟基磷灰石层析操作，其中，阴离子交换层析在羟基磷灰石层析之前进行；阴离子交换层析和羟基磷灰石层析之间没有中间层析操作，其特征在于，阴离子交换层析包括：a)上样操作：将病毒液上样至离子交换层析柱；b)洗脱操作：使用离子交换洗脱液对离子交换层析柱进行洗脱；羟基磷灰石层析包括：a)上样操作：将经过阴离子交换层析后的样液上样至羟基磷灰石层析柱；b)洗脱操作：使用羟基磷灰石洗脱液对羟基磷灰石层析柱进行洗脱；离子交换洗脱液和羟基磷灰石洗脱液的pH值独立为7.0～9.5，独立为磷酸缓冲液、Tris‑HCl缓冲液、Tricine缓冲液、Hepes缓冲液、甘氨酸缓冲液、TEA缓冲液或巴比妥钠缓冲液，缓冲液中离子的浓度为1～50mM；离子交换洗脱液中进一步添加有浓度为50～1000mM的盐；羟基磷灰石洗脱液中进一步添加有浓度为1～500mM的盐。