[发明专利]一种贴壁肿瘤细胞冻存方法及改良冻存液配方在审
| 申请号： | 201810188547.7 | 申请日： | 2018-03-07 |
| 公开（公告）号： | CN108293981A | 公开（公告）日： | 2018-07-20 |
| 发明（设计）人： | 郭建军;檀军;田莹;赵帅;张书琪 | 申请（专利权）人： | 贵州大学 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人： | 李亮;程新敏 |
| 地址： | 550025 贵州省贵*** | 国省代码： | 贵州;52 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供一种贴壁肿瘤细胞冻存方法及改良冻存液配方，通过配置改良细胞冻存液，省去了中间离心环节，可极大的节约实验操作时间，节省实验耗材，提高实验效率，解决传统贴壁肿瘤细胞冻存方法实验操作时间较长，且需要通过离心来去除培养液，操作过程繁琐且对细胞造成的伤害也较大，复苏后的细胞活性较低等问题。属于生物技术领域。 | ||
| 搜索关键词： | 贴壁肿瘤细胞 冻存 实验操作 冻存液 改良 配方 培养液 生物技术领域 细胞冻存液 操作过程 实验效率 细胞活性 耗材 去除 复苏 细胞 节约 伤害 配置 环节 | ||
【主权项】：
1.一种贴壁肿瘤细胞冻存方法，其特征在于：首先，配置改良细胞冻存液，按体积比，包括30％的胎牛血清,20％的二甲基亚砜和50％的DMEM培养基，配制完成后，分装成1ml/管，冻存于‑20℃冰箱中；冻存细胞时先弃旧培养基，沿细胞对侧加入无菌PBS清洗2次，再加入1ml胰蛋白酶，十字形轻轻晃动细胞培养瓶5秒，而后，用巴氏德吸管吸尽胰蛋白酶，置于37℃培养箱中孵育3分钟消化细胞，再加入2ml新鲜培养基，所述新鲜培养基按体积比含90％DMEM培养基和10％FBS，用巴氏德吸管吹打细胞30次，制成单细胞悬液，计数；取三个细胞冻存管，用移液器吸分别取0.5ml细胞悬液加入每个细胞冻存管中，再向冻存管中各加入0.5ml上述改良细胞冻存液，拧紧冻存管盖，标记相关信息，放入程序降温盒中，放入‑80℃冰箱中，24h后转入液氮中长期保存。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于贵州大学，未经贵州大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810188547.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
