[发明专利]一种酶促法合成熊去氧胆酸的方法在审
申请号: | 201810195150.0 | 申请日: | 2018-03-09 |
公开(公告)号: | CN108251491A | 公开(公告)日: | 2018-07-06 |
发明(设计)人: | 秦和平;张和平;钟义华;祝国祥;刘良伏 | 申请(专利权)人: | 中山百灵生物技术有限公司 |
主分类号: | C12P33/02 | 分类号: | C12P33/02 |
代理公司: | 中山市兴华粤专利代理有限公司 44345 | 代理人: | 吴剑锋 |
地址: | 528400 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种酶促法合成熊去氧胆酸的方法,以鹅去氧胆酸为起始原料合成熊去氧胆酸的方法。该方法以鹅去氧胆酸为底物,在50mM的磷酸缓冲液中溶解,首先在NAD、NOX2以及通入氧气的情况下,利用7‑α类固醇脱氢酶催化氧化鹅去氧胆酸得到7‑酮基石胆酸;然后在NAD、L‑苹果酸以及苹果酸脱氢酶存在的情况下,利用7‑β类固醇脱氢酶催化还原7‑酮基石胆酸得到熊去氧胆酸。该方法没有使用有机溶剂,操作简单,反应条件温和易控,原料利用率高,转化率高达99%以上。 | ||
搜索关键词: | 熊去氧胆酸 鹅去氧胆酸 类固醇脱氢酶 基石胆酸 合成 酶促法 苹果酸脱氢酶 磷酸缓冲液 原料利用率 催化还原 催化氧化 反应条件 起始原料 有机溶剂 苹果酸 底物 氧气 溶解 | ||
【主权项】:
1.一种酶促法合成熊去氧胆酸的方法,其特征在于包括如下步骤:A、将鹅去氧胆酸放入反应容器中,加入磷酸缓冲液溶解,调节溶液pH值,加入NAD、NOX2、7‑α类固醇脱氢酶,通入氧气、控制反应温度和反应pH值,反应直到鹅去氧胆酸在溶液中的残留量低于1%,反应完成后升温搅拌,然后降温至常温;B、反应液中加入L‑苹果酸钠、苹果酸脱氢酶、7‑β类固醇脱氢酶,控制反应温度和反应pH值,反应直到7‑酮基石胆酸残留低于0.1%,反应完成后,加碱升温搅拌,然后降温至常温,过滤除去溶液中的固形物,滤液加酸结晶得到UDCA。
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