[发明专利]白洗猪LYRM2基因CDS区的克隆方法在审
申请号: | 201810208941.2 | 申请日: | 2018-03-14 |
公开(公告)号: | CN108441492A | 公开(公告)日: | 2018-08-24 |
发明(设计)人: | 陈祥;苑红霞;敖叶;陈伟 | 申请(专利权)人: | 贵州大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人: | 李亮;程新敏 |
地址: | 550025 贵州省贵*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | 本发明公开了一种白洗猪LYRM2基因CDS区的克隆方法。本发明通过白洗猪LYRM2基因的CDS区成功构建,为探究LYRM2蛋白在猪生物物种中的表达及分布提供技术支持,并为探究LYRM2蛋白对猪的生物学影响提供方法依据,为白洗猪的从分子方面选种培育提供理论依据,避免在获取白洗猪LYRM2基因CDS区时摸索时繁琐的步骤。 | ||
搜索关键词: | 基因 蛋白 克隆 生物学影响 技术支持 生物物种 选种 构建 区时 培育 成功 | ||
【主权项】:
1.一种白洗猪LYRM2基因CDS区的克隆方法,其特征在于,包括以下步骤:将白洗猪皮下脂肪组织RNA经逆转录获得白洗猪的cDNA,将白洗猪的cDNA经引物PCR扩增获得获得LYRM1基因的CDS区序列,将扩增后产物胶回收后与Pucm‑T载体连接,转化进入TOP10感受态细胞进行培养,蓝白斑筛选,选取白色菌落LB液体培养基扩培,PCR检测验证,质粒提取测序验证;所述的引物包括上游引物F和下游引物R,其序列分别为;上游引物F的序列:5’‑ATGGCCACTTCTCGCTTACC‑3’;下游引物R的序列:5’‑ATCTGGCTAAGGCAAGTGTTT‑3’。
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