[发明专利]一种利用二甲戊乐灵在田间诱导枣树同质多倍体的方法

摘要

一种利用二甲戊乐灵在田间诱导枣树同质多倍体的方法，即以安全性高、成本低的二甲戊乐灵为诱变剂，在田间活体条件下，通过愈伤组织途径诱导枣树同质多倍体。对枣树健壮枝条进行截枝处理，迅速用生长调节剂处理形成层，并保湿24 h；约4~6 d后，当截面形成层有透明微弱愈伤出现时，用二甲戊乐灵（含有0.1%二甲基亚砜）处理愈伤组织24~48 h并保湿；当愈伤组织上的再生芽长至2~3 cm后，去除所有覆盖物，对再生芽进行染色体倍性检测。与对照相比（以秋水仙素做诱变剂），利用二甲戊乐灵做诱变剂，诱变率提高了30.3%，成本降低5000倍，而且安全性更高。

主权项

1.一种利用二甲戊乐灵在田间诱导枣树同质多倍体的方法，其特征在于以安全性高、成本低的二甲戊乐灵为诱变剂，在田间活体条件下，通过愈伤组织途径诱导枣树同质多倍体，而且诱变效率高，包括以下2个步骤：（1）愈伤组织诱导 于5~7月份，对直径1.5~3 cm的枣树健壮枝条进行截枝处理，尽量保持截面光滑、无毛边，可使枝皮开裂，增加与药液接触的形成层的面积；迅速用脱脂棉覆盖截面形成层，将含有4.0~5.0 mg/L TDZ+2.0 mg/L AgNO₃的药液1~2 ml滴加在脱脂棉上，以浸湿脱脂棉为度，覆上黑色塑料袋，避光处理；24 h后去除脱脂棉和塑料袋，使用略微湿润的脱脂棉包裹截面，用塑料袋全部套住并绑紧袋口，便于保湿；（2）愈伤组织细胞的染色体加倍和芽再生 约4~6 d后，当截面形成层有透明微弱愈伤出现时，去除覆盖物；将0.01%~0.05%二甲戊乐灵（含有0.1%二甲基亚砜）1~2 ml滴加到脱脂棉上，用脱脂棉覆盖愈伤组织，迅速用黑色塑料袋套住保湿；24~48 h后去除脱脂棉和塑料袋，使用略微湿润的脱脂棉包裹愈伤组织，用塑料袋全部套住并绑紧袋口；当愈伤组织上的再生芽长至2~3 cm后，去除所有覆盖物，15~20 d后对再生芽进行染色体倍性检测。