[发明专利]一种适合烟草基因编辑素材水溶性糖的测定方法

摘要

本发明公开了一种适合烟草基因编辑素材水溶性糖的测定方法，使用以下装置：样品萃取瓶，包括：外套管(1)；内套管(2)；导液管(4)；筛板(3)，位于所述内套管(2)的下端开口内，为一个或多个；该方法包括以下步骤：①烟叶萃取；②过滤和转移；③分析作出色谱图；④与标准色谱图的峰面积，即可得到烟草基因编辑素材水溶性糖的含量。本发明的测定方法首次使用在离子色谱分析柱前加一个在线固相萃取净化柱，具有处理简单、方便、效果好的优点，测定方法具有定量准确、重复性好、检出限低等优点，有效实现烟草基因编辑素材中水溶性糖的高通量分析测定。

主权项

1.一种适合烟草基因编辑素材水溶性糖的测定方法，其特征在于，使用以下装置：样品萃取瓶，包括：外套管(1)，其底部密封且为平底，其口部有一密封圈(11)；内套管(2)，其外径与所述外套管(1)的内径相适配，其的长度大于所述外套管(1)的长度；导液管(4)，位于所述内套管(2)内，其下端有一扩张口与所述内套管(2)的下端内壁密封固定连接，其与所述内套管(2)上端口固定连接形成受压面(21)，其上部伸出所述内套管(2)外部，并回弯向下；筛板(3)，位于所述内套管(2)的下端开口内，为一个或多个；该方法包括以下步骤：①将烟叶在‑80℃下冷冻，然后在40℃烘干，粉碎并过40目筛；②称取步骤(1)得到的粉末0.1g于所述外套管(1)中，加入50mL萃取剂，将所述内套管(2)的一部分插入到所述外套管(1)中并被所述密封圈(11)密封，然后在一定温度下超声萃取20min；③在所述受压面(21)施加向下的力，则所述外套管(1)中的萃取溶液通过所述筛板(3)被过滤后进入所述导液管(4)中，并从导液管(4)流出进入到样品收集瓶中，冷却至室温得到待分析的样品滤液；收集样品滤液1‑1.5mL，进行在线净化离子色谱分析；④采用峰面积法进行定量，通过样品中糖类物质的峰面积与标准工作曲线对比，即可确定所述烟草基因编辑素材水溶性糖的含量。