[发明专利]一种植物鲜叶可溶性糖快速微量测定方法

摘要

本发明涉及植物生物技术领域，具体是一种改良的植物鲜叶可溶性糖快速微量测定方法，直接微量取样，简单提取后采用酶标板快速测定方法，适合于针对大批量材料采用高通量的筛选。本发明优点在于：本发明的方法，不需要烘干过程，采用液氮速冻后研磨粉碎，大大节约了样品处理时间；本发明建立了一套优化的微量离心管处理样品、酶标板测定的微量测定体系，大大节省了蒽酮、浓硫酸等化学试剂的用量，该方法可以配合移液工作站使用，实现高通量检测方法；本发明建立了一套基于植物新鲜组织微量样品的测定方法，为植物活体叶片中可溶性糖含量的时空分布规律研究提供了简便有效的评估手段，为植物的耐逆性研究和品质改良提供有用线索。

主权项

1.一种快速微量测定植物新鲜叶片中可溶性糖含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：A)取植物新鲜叶片10‑100mg，装入离心管中；B)向离心管中加入少许液氮，用研磨棒迅速研磨成粉；C)待液氮挥干，加入1.0ml超纯水，混匀；D)放入100℃沸水浴加热10min；E)取出离心管，10000rpm离心3min；F)吸取上清溶液50μl到另一离心管中；G)依次加入450μl超纯水，20mg/ml的蒽酮100μl和1.84g/cm3的浓硫酸1000μl，混匀；H)放入100℃沸水浴加热；I)取出离心管，冷却10min；J)取显色液采用酶标仪，在620nm波长下测定其吸光度；K)取葡萄糖标准溶液，采用步骤G‑J，进行显色反应，测定吸光度，以吸光度为纵坐标，以糖含量为横坐标，绘制标准曲线，并求出标准线性方程和相关系数R；L)由标准线性方程求出测定糖量，按下式计算原样品中的可溶性糖含量：