[发明专利]一种基于胎牛血清的培养基的培养方法在审
| 申请号： | 201810233420.2 | 申请日： | 2018-03-21 |
| 公开（公告）号： | CN108220232A | 公开（公告）日： | 2018-06-29 |
| 发明（设计）人： | 王翔 | 申请（专利权）人： | 天津博奥科生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 300000 天津市北辰区北辰经*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于胎牛血清的培养基的培养方法，包括以下步骤：1)将下列成分及含量依次加入器皿中：胎牛血清：20ul/ml；重组人胰岛素：5ug/ml；碱性成纤维细胞生长因子：4ng/ml；人转铁蛋白：5ug/ml；亚硒酸：6.84ug/ml；丝氨酸：105ug/ml；氯化胆碱：89.3ug/ml；腺嘌呤：12.2ug/ml；单乙酰胺：14ug/ml；磷酰乙醇胺：0.1mmol/ml；三碘甲状腺氨酸：13.46pg/ml，每加入一种成分搅拌2～3分钟；2)采用吸管吸取步骤1)中的液体3mL～5mL到15mLd离心管中，离心管以200g/min的转速离心3min～5min，弃上清后置于细胞培养箱中培养2小时；3)吸取步骤2)中培养2小时后的细胞悬液，按体积比1:20～1:25接种量接种于DMEM培养液中，培养3天～4天后即得。本发明使间充质干细胞在细胞形态和增殖能力方面都得到了加强。 | ||
| 搜索关键词： | 胎牛血清 培养基 离心管 碱性成纤维细胞生长因子 三碘甲状腺氨酸 吸管 间充质干细胞 重组人胰岛素 人转铁蛋白 细胞培养箱 氯化胆碱 细胞形态 细胞悬液 增殖能力 转速离心 单乙酰 接种量 丝氨酸 体积比 腺嘌呤 亚硒酸 乙醇胺 器皿 接种 | ||
【主权项】：
1.一种基于胎牛血清的培养基的培养方法，用于培养人间充质干细胞，其特征在于，包括以下步骤：1)将下列成分及含量依次加入器皿中：胎牛血清：20ul/ml；重组人胰岛素：5ug/ml；碱性成纤维细胞生长因子：4ng/ml；人转铁蛋白：5ug/ml；亚硒酸：6.84ug/ml；丝氨酸：105ug/ml；氯化胆碱：89.3ug/ml；腺嘌呤：12.2ug/ml；单乙酰胺：14ug/ml；磷酰乙醇胺：0.1mmol/ml；三碘甲状腺氨酸：13.46pg/ml，每加入一种成分搅拌2～3分钟；2)采用吸管吸取步骤1)中的液体3mL～5mL到15mLd离心管中，所述离心管以200g/min的转速离心3min～5min，弃上清后置于细胞培养箱中培养2小时；3)吸取步骤2)中培养2小时后的细胞悬液，按体积比1:20～1:25接种量接种于DMEM培养液中，培养3天～4天后，并定期观察，即得。
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