[发明专利]一种识别氨基酸及肽类化合物绝对构型和光学纯度的方法

摘要

本发明提供一种通过电子圆二色谱方法来确定氨基酸及肽类化合物绝对构型和光学纯度的方法，该方法以邻苯二甲醛作衍生化试剂，通过核磁以及高效液相监测反应过程，发现氨基酸与邻苯二甲醛的衍生化反应速度快，且无副产物产生。经核磁氢谱与碳谱分析，确定衍生化后产物为异吲哚结构。产物在272nm附近产生电子圆二色谱信号，进一步的实验显示原料浓度以及比例对产物结构无影响。本发明还建立了对映体过量与各向异性因子的标准曲线，以确定氨基酸或肽类化合物的光学纯度。本发明优点在于反应速度快、样品用量少、灵敏度高；分析测试操作简单，原料浓度以及比例对产物结构无影响；可适用于所有手性伯胺类氨基酸以及N端为裸露伯胺的肽类化合物。

主权项

1.一种识别氨基酸及肽类化合物绝对构型和光学纯度的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)衍生化：将待测氨基酸样品或肽类化合物样品溶于碱性甲醇溶液中，加入邻苯二甲醛固体或其甲醇溶液，振摇，得待测氨基酸或肽类化合物样品的衍生化产物；(2)采集电子圆二色谱：通过电子圆二色谱仪采集待测氨基酸或肽类化合物样品衍生化产物的电子圆二色谱；(3)构型确定：将待测氨基酸样品衍生化产物的电子圆二色谱与标准氨基酸衍生化产物的电子圆二色谱进行比较，确定待测氨基酸样品的绝对构型；(4)光学纯度确定：建立对映体过量与特定波长下各向异性因子的标准曲线，确定其光学纯度；其中所述氨基酸选自天然的或非天然的伯胺类手性氨基酸；所述肽类化合物选自N端为裸露的伯胺类手性氨基酸的肽类化合物；所述标准氨基酸衍生化产物的电子圆二色谱是由已知绝对构型的、与待测氨基酸或肽类化合物样品相同种类的氨基酸或肽类化合物，在相同的条件下进行衍生化反应并进行电子圆二色谱采集获得。