[发明专利]一种食品中苏丹红I胶体金刚碳检测试纸条的制备方法

摘要

本发明涉及一种食品中苏丹红I胶体金刚碳检测试纸条的制备方法，该方法用黑色标记物胶体金刚碳代替胶体金显色，有明显的优势，检测线为微红色为阳性，变黑则为阴性。这样既保持了免疫法的快速，操作简单等有点，又提高了灵敏度和特异性。

主权项

1.一种食品中苏丹红I胶体金刚碳检测试纸条的制备方法，其特征在于包括以下步骤：S1：胶体碳金钢化：选择粒径在10‑100nm之间胶体碳溶液，接着在3个大气压的压力下煮沸胶体碳溶液30‑40min，40‑60KHZ然后超声30‑40min，得到均匀分散成的胶体金刚碳溶液，最后将其稀释成标准浓度的胶体金刚碳溶液；S2：取粒径为40nm的胶体金钢碳溶液100mL，调至pH7.2，分别标记抗体得到碳标抗体溶液；S3：先将碳标抗体溶液于常温、转速为1200‑1500rpm条件下离心20‑30min，弃去由凝聚的碳颗粒形成的沉淀，取黑色上清溶液于4℃再8000r/min离心30min，离心后溶液分为三层：透明上清液、管底可流动的黑色沉淀及管底壁上黑色致密的毯子碳颗粒层，将可流动的黑色沉淀转移到另外一个离心管中，用重悬液重悬至原量0.8倍，加入0.1％的叠氮钠4℃保存备用；S4：将样品垫和碳标抗体结合垫通过处理液进行水化和封闭处理：样品垫和结合垫经剪裁后通过浸蘸前处理液进行水化和封闭处理，浸泡30min后于温度37℃下烘干2小时，结合垫处理液为：含有终质量浓度为0.3％吐温20、2％海藻糖、10％蔗糖及pH值为7.2、浓度为0.01mol/L的PBS溶液；S5：将步骤s2碳标抗体溶液喷涂在碳标抗体结合垫上：喷涂机将碳标抗体在结合垫上均匀喷涂，喷样量在30μL/cm2，37℃真空干燥；S6：检测点抗原和控制点二抗的包被：分别将包被抗原均稀释到0.8mg/mL，二抗稀释到0.2mg/mL，点样在NC膜上分别为检测点和质控点，于温度37℃下干燥；S7：试纸条的组装：将2.4cm×0.8cmNC膜、1.8cm×0.8cm吸水纸、0.6cm×0.8cm胶体碳结合垫、1.5cm×0.8cm样品垫依次粘贴在PVC胶板上，即成胶体金刚碳试纸条大板。