[发明专利]适应MDCK细胞全悬浮培养的无血清培养基及其制备方法

摘要

本发明涉及细胞培养技术领域，具体而言，涉及一种适应MDCK细胞全悬浮培养的无血清培养基及其制备方法。该培养基包括多种氨基酸、维生素、盐类、脂类、微量元素、缓冲剂、激素等成分；该无血清培养基可采用常规的制备方法进行制取。本发明所提供的培养基用于MDCK的全悬浮培养，不产生伴随蛋白成分的副作用，安全性好，不同批次差异小，成本低，利于分离细胞下游产品、安全性好，适于用作生产疫苗等生物制品。且该培养基不仅能够减少该细胞培养时团聚的现象，还可进一步增加其耐低氧的特性，增加该细胞活率。

主权项

1.一种适应MDCK细胞全悬浮培养的无血清培养基，以溶解后为1升溶液计算，所述培养基包括以下成分：生物素1～10×10‑8M、氯化钙1～5×10‑3M、硫酸铜2.8～12.8×10‑9M、氰钴胺1～10×10‑7M、D‑泛酸钙2～8×10‑5M、D‑葡萄糖1.6～2.0×10‑2M、硫酸亚铁2～10×10‑6M、叶酸0.5～1.5×10‑4M、谷胱甘肽3.5～9.5×10‑7M、氢化可的松3～7×10‑8M、次黄嘌呤1～5×10‑5M、肌醇1～10×10‑5M、硝酸铁0.3～2×10‑7M、L‑丙氨酸1～20×10‑5M、L‑精氨酸1～20×10‑4M、L‑天冬酰胺1～20×10‑5M、L‑天冬氨酸1～20×10‑5M、L‑半胱氨酸0.1～10×10‑4M、L‑胱氨酸0.1～10×10‑4M、L‑谷氨酸1～20×10‑5M、L‑谷氨酰胺1～10×10‑3M、甘氨酸1～10×10‑4M、L‑组氨酸0.5～10×10‑4M、L‑异亮氨酸0.5～10×10‑4M、L‑亮氨酸0.5～10×10‑4M、L‑赖氨酸1～20×10‑4M、L‑蛋氨酸1～10×10‑4M、L‑苯丙氨酸1～10×10‑4M、L‑脯氨酸0.1～10×10‑4M、L‑丝氨酸1～20×10‑4M、L‑苏氨酸1～20×10‑4M、L‑色氨酸1～20×10‑5M、L‑酪氨酸1～10×10‑4M、L‑缬氨酸1～20×10‑4M、硫辛酸1～20×10‑7M、氯化镁1～20×10‑5M、硫酸镁1～20×10‑4M、烟酰胺1～20×10‑5M、对氨基苯甲酸0.5～5g、氯化钾1～10×10‑3M、腐胺1～10×10‑7M、吡多辛1～10×10‑7M、核黄素1～10×10‑7M、碳酸氢钠1～10×10‑2M、氯化钠0.5～10×10‑1M、磷酸氢二钠1～10×10‑4M、磷酸二氢钠1～10×10‑4M、丙酮酸钠0.1～10×10‑3M、硫胺素1～20×10‑6M、胸腺嘧啶脱氧核苷0.5～10×10‑6M、硫酸锌0.1～10×10‑6M、氯化胆碱0.1～10×10‑4M、胰岛素5～15mg、转铁蛋白5～15mg、三典甲状腺氨酸1～20×10‑12M以及二硫苏糖醇1～20×10‑6M。