[发明专利]纤溶酶抑制剂rPI-T1的分离纯化方法有效
| 申请号： | 201810282901.2 | 申请日： | 2018-04-02 |
| 公开（公告）号： | CN110343170B | 公开（公告）日： | 2021-09-28 |
| 发明（设计）人： | 徐梅;杨宇;陈宏超;康乐;李娜;石乔;兰海英;石皎;李萍;王宏英;薛百忠 | 申请（专利权）人： | 远大生命科学（辽宁）有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/81 | 分类号： | C07K14/81;C12P21/02;C07K1/18;C07K1/14;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人： | 李渤;郭广迅 |
| 地址： | 110171 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： |
本发明涉及一种纤溶酶抑制剂rPI‑T1的分离纯化方法，其包括发酵分泌表达rPI‑T1的毕赤酵母，将包含rPI‑T1的发酵液的上清液经Capto‑MMC层析柱洗脱，收集得到包含rPI‑T1的洗脱液I；将获得的洗脱液I经Qhp层析柱洗脱，收集得到包含rPI‑T1的洗脱液II。该方法是一种毕赤酵母分泌表达蛋白rPI‑T1的简单、快速、稳定、高效的分离纯化方法。涉及以毕赤酵母菌无机盐培养基发酵高效表达目标蛋白rPI‑T1，并将发酵液上清经离心、微滤、层析等步骤进行纯化的方法。本方法纯化收率高，热原检测批间稳定合格，活性蛋白收率达到90％以上，C |
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| 搜索关键词： | 纤溶酶 抑制剂 rpi t1 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种纤溶酶抑制剂rPI‑T1的分离纯化方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)发酵分泌表达重组蛋白rPI‑T1的毕赤酵母，将包含rPI‑T1的发酵液的上清液经Capto‑MMC层析柱洗脱，收集得到包含rPI‑T1的洗脱液I；(2)将步骤(1)获得的洗脱液I经Qhp层析柱洗脱，收集得到包含rPI‑T1的洗脱液II。
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