[发明专利]一种基于QPCR定量检测畜禽肉中牛源性成分的方法

摘要

本发明公开了一种基于QPCR定量检测畜禽肉中牛源性成分的方法。该方法是利用实时荧光PCR技术对肉制品中的牛源性成分含量进行定量分析，应用生物信息学手段，对15种动物基因组序列进行分析，筛选单拷贝基因设计通用引物和特异性引物，利用内参基因校正牛源种属特异性基因的百分含量，消除量值结果的偏差，获得真实可信的食品掺假数值，有效提高检测方法的灵敏度和准确性。本发明的检测方法在3h之内即可完成牛源性成分含量鉴定工作，具有简单易行、灵敏度高、快速、费用低、便于推广等特点，为动物源成分量化掺伪鉴定开辟了广阔的前景。

主权项

1.用于鉴定牛源性成分含量的PCR扩增引物及探针引物，其特征在于，包括内参基因Ref‑5引物正向序列：5′‑TTATGAATTATTGCAGCTGACTACCA‑3′，Ref‑5反向序列：5′‑CATGGGCCGCTCACAAC‑3′，Ref‑5探针序列：5′‑FAM‑ACCTCACACAGCGTTG‑MGB‑3′；牛源种属特异性基因Cattle‑2引物正向序列：5′‑CCTTCTGCCTTCTTCTAA‑3′，Cattle‑2反向序列：5′‑CCTCAACATCTCCAAGAA‑3′，Cattle‑2探针序列：5′‑FAM‑TTCAATCAAGAGCAGCCAGCAA‑TAMRA‑3′。