[发明专利]一种筛选黑果枸杞离体再生相关MSAP位点的方法在审
| 申请号： | 201810289868.6 | 申请日： | 2018-03-30 |
| 公开（公告）号： | CN108588192A | 公开（公告）日： | 2018-09-28 |
| 发明（设计）人： | 王钦美;王皓;崔进;崔建国;李娜;林梅 | 申请（专利权）人： | 沈阳农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12Q1/6855;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 长春市东师专利事务所 22202 | 代理人： | 张铁生;刘延军 |
| 地址： | 110866 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种筛选黑果枸杞离体再生相关MSAP位点的方法，它包括：1）培养无菌种苗；2）接种叶片外植体，获得愈伤组织和再生植株；3）将供体植株及叶再生植株驯化移栽；4）提取愈伤组织、移栽和未移栽供体植株叶片、移栽和未移栽再生植株叶片的DNA；5）分别采用EcoRⅠ联合MspⅠ或者HpaⅡ对提取的各类DNA进行双酶切，并连接双链接头；6）预PCR扩增反应；7）选择性PCR扩增反应；8）毛细管电泳；9）统计分析，筛选出黑果枸杞叶片再生相关的MSAP位点；10）特异性条带的回收、测序和分析；本发明可迅速筛选出叶片再生相关MSAP位点，且与移栽驯化无关；这类位点的挖掘对最终揭示木本植物叶片脱分化和再分化机理有重要意义，丰富了植物表观遗传学内容。 | ||
| 搜索关键词： | 移栽 位点 叶片 黑果枸杞 再生植株 筛选 供体植株 离体再生 愈伤组织 驯化 木本植物 表观遗传学 毛细管电泳 特异性条带 叶片外植体 再生 选择性PCR 扩增反应 无菌种苗 重要意义 统计分析 双酶切 脱分化 测序 双链 接种 分化 回收 挖掘 分析 联合 | ||
【主权项】：
1.一种筛选黑果枸杞离体再生相关MSAP位点的方法，它包括以下步骤：1）培养无菌种苗；2）接种叶片外植体，获得愈伤组织和再生植株；3）将供体植株及叶再生植株驯化移栽；4）提取愈伤组织、移栽和未移栽供体植株叶片、移栽和未移栽再生植株叶片的DNA；5）分别采用EcoRⅠ联合MspⅠ或者HpaⅡ对提取的各类DNA进行双酶切，并连接双链接头；6）预PCR扩增反应；7）选择性PCR扩增反应；8）毛细管电泳；9）统计分析，筛选出愈伤组织特异性的MSAP位点，即黑果枸杞叶片再生相关的MSAP位点；10）特异性条带的回收、测序和分析。
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