[发明专利]小分子诱导多能性干细胞分化为视网膜色素上皮细胞的方法在审
| 申请号： | 201810295951.4 | 申请日： | 2018-04-04 |
| 公开（公告）号： | CN108531443A | 公开（公告）日： | 2018-09-14 |
| 发明（设计）人： | 郭晓令;陈建苏;葛仁山 | 申请（专利权）人： | 温州医科大学附属第二医院;温州医科大学附属育英儿童医院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N5/10 |
| 代理公司： | 温州名创知识产权代理有限公司 33258 | 代理人： | 曾建芳 |
| 地址： | 325000 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种完全利用小分子诱导多能性干细胞分化为视网膜色素上皮细胞(LCs)的方法。该方法步骤如下，首先将克隆团样hiPSCs制备成单散hiPSCs，用去除bFGF的E7培养基预处理培养2天；然后在不同时间点向分化培养基外加一定量小分子包括：DKK‑1,Noggin,Nicotinamide,IGF‑1,bFGF,Activin A和SU5402促进分化；最后采用手工剔除非RPE样细胞富集分化靶细胞(hiPSCs‑RPE)，并完成鉴定。按照本发明方法诱导，可以成功将hiPSCs分化为hRPE细胞，从而为采用自体细胞移植治疗RPE退性型疾病提供细胞来源。 | ||
| 搜索关键词： | 分化 小分子 视网膜色素上皮细胞 诱导多能性干细胞 预处理 分化培养基 细胞富集 细胞来源 移植治疗 自体细胞 培养基 靶细胞 时间点 去除 制备 剔除 诱导 克隆 细胞 疾病 成功 | ||
【主权项】：
1.一种小分子诱导多能性干细胞分化为视网膜色素上皮细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：①将获得的克隆团样的hiPSCs培养获取单散hiPSCs，②将培养的单散hiPSCs用去除bFGF的E7培养基进行培养2天后进行分化培养，分化培养过程中加入小分子促进诱导多能性干细胞分化为视网膜色素上皮细胞，小分子成分包括DKK‑1、Noggin、Nicotinamide、IGF‑1、bFGF、Activin A和SU5402，然后手工剔除形态非RPE铺路石样的杂细胞后，传达培养，富集得到hiPSCs‑RPE，③完成免疫荧光检测、逆转录PCR(RT‑PCR)检测、蛋白印迹检测、荧光素钠渗漏检测、POS吞噬功能检测、Z‑stack共聚焦膜极性检测。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于温州医科大学附属第二医院、温州医科大学附属育英儿童医院，未经温州医科大学附属第二医院、温州医科大学附属育英儿童医院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810295951.4/，转载请声明来源钻瓜专利网。
