[发明专利]一种利用里氏木霉分批补料发酵高效生产β-葡萄糖苷酶的方法

摘要

本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种利用里氏木霉通过分批补料发酵高效生产β‑葡萄糖苷酶的方法。该方法包括以下步骤：将重组里氏木霉（菌种保藏号CGMCC No.12768）接种至发酵培养基中，发酵24‑28小时后开始分批补料培养，当溶氧高于21%时流加葡萄糖，当溶氧低于19%时停止流加，总发酵时间在100小时以内，β‑葡萄糖苷酶活性超过70 IU/mL。本发明方法解决了β‑葡萄糖苷酶生产过程中使用不可溶诱导物、高成本诱导物和生产强度低等问题，获得的β‑葡萄糖苷酶浓度高，可应用于生物能源及制备寡糖等领域。

主权项

1.一种利用里氏木霉通过分批补料发酵高效生产β‑葡萄糖苷酶的方法，其特征在于：包括下述步骤：A：将里氏木霉接种至发酵培养基中，所述发酵培养基配方为：葡萄糖 10‑15 g/L，麸皮 10 g/L, 尿素0.3 g/L, (NH₄)₂SO₄ 1.4 g/L, KH₂PO₄ 2 g/L, MgSO₄•7H₂O 0.3 g/L, CaCl₂ 0.4 g/L, FeSO₄•7H₂O 5 mg/L, MnSO₄•H₂O 1.7 mg/L, ZnSO₄•7H₂O1.4 mg/L, CoCl₂ 2 mg/L, 吐温80 0.2 ml/L；B：发酵20‑28 h后，待初始葡萄糖消耗完开始流加培养，流加培养方法是，当发酵液中溶氧高于21%时流加葡萄糖，当发酵液中溶氧低于19%时停止流加葡萄糖，控制溶氧在20%上下；C：发酵80‑100 h后，停止发酵。