[发明专利]血清中蔗糖测定方法

摘要

本发明公开了一种血清中蔗糖测定方法，属于利用可见光，通过测试反应的结果产生颜色变化来测试材料的方法。本发明的技术方案是：工具酶及指示酶同在试剂I中，试剂II仅有蔗糖酶有效成分；其测定方法为：血清中葡萄糖先与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，血清中葡萄糖与试剂Ⅰ反应生成醌亚胺，加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4～7分钟，蔗糖在蔗糖酶的作用下水解生成α‑D‑葡萄糖和β‑D‑果糖，水解生成的α‑D‑葡萄糖与试剂Ⅰ反应产生醌亚胺。仪器在540nm波长处检测，以试剂Ⅰ反应产生的醌亚胺为空白，由试剂Ⅱ反应产生的醌亚胺计算出蔗糖的含量。本发明检测时不受内源性葡萄糖影响，其方法经济方便易行，不需要特殊检测设备，是一种准确性更高的蔗糖检测方法。

主权项

1.一种血清中蔗糖测定方法，其特征在于：工具酶及指示酶同在试剂I中，试剂II中仅有蔗糖酶有效成分；其测定方法为：血清中葡萄糖先与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，血清中葡萄糖与试剂Ⅰ反应生成醌亚胺，加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4～7分钟，蔗糖在蔗糖酶的作用下水解生成α‑D‑葡萄糖和β‑D‑果糖，水解生成的α‑D‑葡萄糖与试剂Ⅰ反应产生醌亚胺，仪器在540nm波长处检测，以试剂Ⅰ反应产生的醌亚胺为空白，由试剂Ⅱ反应产生的醌亚胺计算出蔗糖的含量。计算公式为：反应OD蔗糖＝OD2—OD1×[(SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]蔗糖浓度＝F×OD蔗糖其中OD蔗糖是蔗糖产生的吸光度。OD1是样品加入试剂Ⅰ反应后测得的吸光度，OD2蔗糖是加入试剂Ⅱ反应后测得的吸光度，SV是样品的体积，R1V1是试剂Ⅰ的体积，R2V2是试剂Ⅱ的体积。F是校正因数。加入试剂II后OD1的稀释倍数为[(SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]，加入试剂II后的吸光度即为OD1×[(SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]。所以，由蔗糖产生的醌亚胺的吸光度为：OD蔗糖＝OD2‑OD1×[(SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]，即OD蔗糖＝OD2–(3+225)/(3+225+75)×OD1。只要测出OD1和OD2即可计算出蔗糖的浓度。