[发明专利]基于基因表达监控的麦芽溶解度评价方法

摘要

本发明提供了一种基于基因表达监控的麦芽溶解度评价方法，涉及食品检测领域。该方法包括总RNA的提取与纯化、逆转录反应制备cDNA模板、多重PCR反应、毛细管电泳得到基因电泳图谱、图谱数据分析得到麦芽溶解相关基因的表达峰高H、利用麦芽溶解相关基因的表达峰高H计算麦芽溶解度库值，针对麦芽溶解相关基因LD，AMY1，AMY4，GLU，ASP，CYS，SER Ⅰ，SER Ⅲ，MET，TRX，PDI，SEP，WRKY和内控基因ACT。该方法能够基于淀粉、蛋白水解酶的基因表达监控，建立预测麦芽库尔巴哈值的方法，从而用于评价麦芽溶解度；与传统的测定方法相比，准确度高，效率高且方法简便。

主权项

1.基于基因表达监控的麦芽溶解度评价方法，其特征在于，包括总RNA的提取与纯化、逆转录反应制备cDNA模板、多重PCR反应、毛细管电泳得到基因电泳图谱、图谱数据分析得到麦芽溶解相关基因的表达峰高H、利用麦芽溶解相关基因的表达峰高H计算麦芽溶解度库值，针对麦芽溶解相关基因LD，AMY1，AMY4，GLU，ASP，CYS，SERⅠ，SERⅢ，MET，TRX，PDI，SEP，WRKY和内控基因ACT；逆转录反应制备cDNA模板应用引物为SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.26和SEQ ID NO.28；多重PCR反应中应用引物SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.25和SEQ ID NO.27；其中，利用上述麦芽溶解相关基因的表达峰高H计算麦芽溶解度库值的公式如下：麦芽溶解度库值＝55.10+10*[‑0.49*H(AMY1)/H(ACT)‑0.50*H(TRX)/H(ACT)‑0.26*H(SERⅠ)/H(ACT)‑1.50*H(MET)/H(ACT)+0.25*H(CYS)/H(ACT)‑0.31*H(PDI)/H(ACT)+0.24*H(ASP)/H(ACT)+0.78*H(SEP)/H(ACT)+0.87*H(WRKY)/H(ACT)+4.90*H(LD)/H(ACT)+10.57*H(AMY4)/H(ACT)‑3.36*H(GLU)/H(ACT)‑2.93*H(SERⅢ)/H(ACT)]。