[发明专利]人血清中25羟基维生素D的检测方法在审
| 申请号： | 201810339732.1 | 申请日： | 2018-04-16 |
| 公开（公告）号： | CN108490096A | 公开（公告）日： | 2018-09-04 |
| 发明（设计）人： | 宁云山;周景权;李妍 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 曾银凤;万志香 |
| 地址： | 510515 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种血清中25羟基维生素D的检测方法，包括样品前处理以及样品检测的步骤，具体为：取人血清样品，加入含有25羟基维生素D内标物的甲醇溶液，然后向所述人血清样品中加入硫酸锌水溶液和甲醇进行蛋白沉淀，充分混匀后加入正己烷溶剂进行萃取，再充分混匀后离心，取上清液并进行干燥后加入复溶液，得到待测样品；再对所述待测样品用超高效液相色谱串联四极杆质谱仪进行检测。本发明的检测方法前处理简单，灵敏度高，特异性、抗基质干扰能力强，检测时间短，所需样品量少，通量高。 | ||
| 搜索关键词： | 羟基维生素D 检测 人血清样品 待测样品 混匀 超高效液相色谱 硫酸锌水溶液 样品前处理 蛋白沉淀 基质干扰 甲醇溶液 取上清液 样品检测 复溶液 灵敏度 内标物 能力强 前处理 人血清 四极杆 样品量 正己烷 质谱仪 血清 溶剂 甲醇 通量 萃取 串联 | ||
【主权项】：
1.一种人血清中25羟基维生素D的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：样品前处理：取人血清样品，加入含有25羟基维生素D内标物的甲醇溶液，然后向所述人血清样品中加入硫酸锌水溶液和甲醇进行蛋白沉淀，充分混匀后加入正己烷溶剂进行萃取，再充分混匀后离心，取上清液并进行干燥后加入复溶液，得到待测样品；样品检测：对所述待测样品用超高效液相色谱串联四极杆质谱仪进行检测，其中，超高效液相色谱的条件包括：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC HSS T3 Column,2.1×50mm,1.8μm；色谱柱温度：37℃‑43℃；进样量：18‑22uL；流速：0.42‑0.48mL/min；流动相：流动相A为含有1.8‑2.2mM醋酸铵和0.09‑0.11v/v％甲酸的水溶液，流动相B为含有1.8‑2.2mM醋酸铵和0..09‑0.11v/v％甲酸的甲醇溶液，梯度洗脱；所述25羟基维生素D为25羟基维生素D2和/或25羟基维生素D3，所述25羟基维生素D内标物为3d‑25羟基维生素D2和/或6d‑25羟基维生素D3。
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