[发明专利]一种烟草早花苗期判定方法

摘要

本发明涉及一种烟草早花苗期判定方法，包括如下步骤：步骤（1）、样品的采集；步骤（2）、样品的制备；步骤（3）、红外扫描；步骤（4）、结果分析判定。本发明操作时间短，仅需要2min就可以诊断的高通量快速检测分析，可以用于基因编辑素材的早期病害诊断和病害分析等的高通量初级筛选。本发明诊断结果准确，可以提前将早花成苗期和正常成苗期烟叶进行区分，进而及时进行相应的处理，减少生产损失，节约人力物力，提高烟草的品质，具有重要的经济价值。

主权项

1.一种烟草早花苗期判定方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤（1）、样品的采集选择烟草试材，采用无菌组织培养方法育苗，待烟苗达到10cm左右后，挑选长势和径高均一致的烟苗移栽到水培室，进入成苗期取样，取中部第5‑9片烟叶中的一片或多片烟叶；步骤（2）、样品的制备将步骤（1）的烟叶去除叶脉取叶片，用液氮环境下将烟叶放入玛瑙研钵，冷冻研磨为细粉，然后进行冷冻干燥；步骤（3）、红外扫描取样磨粉压片，然后进行红外测试；扫描时自动扣除H2O和CO2的干扰，得到原始光谱依次进行吸光度、自动基线校正、归一化处理得相应的标准化光谱；步骤（4）、结果分析判定根据步骤（3）的标准化光谱，进行判定，当满足下列条件时，即可判定该烟草试材为早花成苗，判定条件如下：A、在1620‑1624 cm‑1和1527‑1532 cm‑1处分别出现酰胺I带和II带吸收峰；B、在1075‑1079cm‑1处多糖吸收I带吸收峰；C、选用多糖吸收I带吸收峰的吸光度与酰胺I带的吸收峰的吸光度面积进行比较，即A糖I／A酰I，面积比为0.48‑0.71；D、在1025‑1030cm‑1间出现多糖物质的特征吸收峰。