[发明专利]一种FFPE样本circRNA高通量测序文库的构建方法在审
申请号: | 201810354803.5 | 申请日: | 2018-04-19 |
公开(公告)号: | CN108546700A | 公开(公告)日: | 2018-09-18 |
发明(设计)人: | 丁向明;孙萍;刘明;李杰;申健 | 申请(专利权)人: | 广州密码子基因科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/6806;C12Q1/6869;C40B50/06 |
代理公司: | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人: | 张玲春 |
地址: | 510663 广东省广州市高新技术产业开发*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)样本circRNA高通量测序文库的构建方法,具体包括以下步骤:(1)从石蜡切片中提取总RNA;(2)将样本RNA加上一段PolyA尾;(3)Oligo dT磁珠捕获分离线性RNA;(4)进一步去除残留的线性RNA;(5)构建circRNA高通量测序文库。本发明针对FFPE样本RNA有损伤、含量低、完整性差的特点,提供的一种FFPE样本circRNA高通量测序文库的构建方法操作简单、耗时短、成本低,且能稳定获得满足高通量测序要求的文库,避免了传统文库构建方法中样本需求量大、去除rRNA成本高、效率低等问题。 | ||
搜索关键词: | 样本 测序文库 高通量 构建 去除 福尔马林 高通量测序 提取总RNA 分离线性 石蜡包埋 石蜡切片 文库构建 效率低等 磁珠 捕获 文库 需求量 耗时 损伤 残留 | ||
【主权项】:
1.一种FFPE样本circRNA高通量测序文库的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)从石蜡切片中提取总RNA;(2)将样本RNA加上一段PolyA尾;(3)Oligo dT磁珠捕获分离线性RNA;(4)进一步去除残留的线性RNA;(5)构建circRNA高通量测序文库。
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