[发明专利]一种制备肌肽的新工艺方法

摘要

本发明涉及一种制备肌肽的新工艺方法，包括以下步骤：A.β‑丙氨酸甲酯盐酸盐合成；1.1向反应釜中加入甲醇，控温0‑20℃，将氯化亚砜滴入其中，滴加完毕，加入β‑丙氨酸，30‑60℃保温搅拌1‑5h；1.230‑50℃减压，真空度≤‑0.09MPa，浓缩，浓缩至无馏分流出，得β‑丙氨酸甲酯盐酸盐。本发明适用于肌肽的制备。

主权项

1.一种制备肌肽的新工艺方法，其特征在于：包括以下步骤：A.β‑丙氨酸甲酯盐酸盐合成；1） 向反应釜中加入甲醇，控温0‑20℃，将氯化亚砜滴入其中，滴加完毕，加入β‑丙氨酸，30‑60℃保温搅拌1‑5h；2） 30‑50℃减压，真空度≤‑0.09MPa，浓缩，浓缩至无馏分流出，得β‑丙氨酸甲酯盐酸盐；B.酶反应；1）向反应釜中加入L‑组氨酸、去离子水、β‑丙氨酸甲酯盐酸盐；2） 在15‑45℃，用碱性溶液调节pH值至7.0‑9.0；3） 加入酶，加酶的量为反应液总量的1%‑3%，该酶的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；25‑45℃搅拌反应，反应过程中用碱性溶液控制反应体系pH值在7.0‑9.0；C.肌肽粗品制备；1）反应完毕，放料，料液离心除去不溶物，收集滤液；2）将得到的滤液通过超滤机进行超滤，收集超滤透析液；3）将得到的超滤透析液通过纳滤机进行纳滤，收集纳滤浓缩液；4）将纳滤浓缩液上树脂柱，树脂柱的径高比为0.05‑0.2，上样pH值为5.0‑7.0；5）用纯化水冲洗树脂柱；6）用1%‑5%的氨水洗脱解吸附树脂柱，收集茚三酮显色部分洗脱液；7）将收集的洗脱液50‑80℃减压，真空度≤‑0.09MPa，浓缩至肌肽含量20‑40%；8）加入浓缩液的2‑8倍量的析晶溶剂，0‑25℃搅拌析晶10‑24h；9）析晶完毕，放料离心，30‑50℃减压，真空度≤‑0.09MPa，干燥6‑8h，得肌肽粗品；D.肌肽粗品精制；1）肌肽粗品加入水溶解；2）往滤液中加入有机溶剂，0‑25℃搅拌析晶10‑24h；3）析晶完毕，放料离心，30‑50℃减压，真空度≤‑0.09MPa，干燥6‑8h，得肌肽精品。