[发明专利]一种格力兜兰种子非共生萌发的培养方法

摘要

本发明公开一种格力兜兰种子非共生萌发的培养方法，如下步骤：将格力兜兰果荚清洗、消毒灭菌，后在无菌操作台上用无菌剪刀将果荚剪为两段，将种子播散到已灭菌的萌发培养基中，在暗室中25℃暗培养，以出现白色原球茎作为种子萌发的标志。种子产生白色原球茎后，统计格力兜兰种子萌发率。种子萌发形成原球茎后，将其转入光照下继续培养，原球茎全变为绿色后，转接至格力兜兰原球茎转接培养基中继续光照培养。所述的格力兜兰种子萌发培养基以花宝1号为基础培养基，内添加蔗糖和琼脂，并分别添加有活性炭、椰子粉，该格力兜兰种子萌发培养方法及萌发培养基的使用，能促使格力兜兰种子萌发，并提高种子的萌发率，为格力兜兰种子成苗及引种回归奠定基础，有利于格力兜兰保育工作的开展。

主权项

1.一种格力兜兰种子非共生萌发的培养方法，步骤如下：（1） 采集成熟但未裂开的格力兜兰果荚，用软毛刷蘸取洗衣粉清洗表面后自来水清洗，在无菌工作台用蒸馏水清洗果荚表面后，用质量浓度为70 %‑75 %的酒精擦拭果荚表面20‑30s，再用质量浓度5%‑10%的次氯酸钠溶液浸泡消毒15‑20 min，灭菌蒸馏水冲洗干净，用无菌剪刀将果荚剪成两段，获得格力兜兰种子；其特征在于，还包括如下步骤：（2）用无菌镊子夹着包含格力兜兰种子的果荚，将种子播撒于种子萌发培养基表面，于25 ℃下暗培养至种子萌发，统计种子萌发率；种子萌发培养基产生白色原球茎后，将其转移至光照下继续培养，光照时间为12 h/d，待原球茎全变为绿色；所述的种子萌发培养基配方为：1 g/L的花宝1号、7 g/L琼脂、20 g/L蔗糖、0.5 g/L活性炭粉和10 g/L椰子粉；（3） 在超净工作台中将原球茎全变绿的种子萌发培养基用无菌小刀切成直径约5 mm 的圆形琼脂块，用无菌镊子夹着琼脂块转接到格力兜兰原球茎转接培养基中，每个转接培养基均匀的放4‑5个琼脂块，转接完成后置于光照下继续光照培养，光照时间为12 h/d；所述的格力兜兰原球茎转接培养基配方为：1 g/L花宝1号、7 g/L琼脂、20 g/L蔗糖、0.5 g/L活性炭粉、10 g/L椰子粉、1.0 mg/L细胞分裂素6‑苄氨基腺嘌呤（6‑BA）和0.2 mg/L 植物生长素萘乙酸（NAA）。