[发明专利]丛枝菌根真菌高效菌种快速筛选与鉴定方法

摘要

本发明公开了一种丛枝菌根真菌高效菌种快速筛选与鉴定方法，通过在岩溶干旱环境中，采集植物根围土壤样品，通过高通量测序先进技术及群落多样性指标筛选当地土著丛枝菌根真菌优势菌种，然后将所筛选优势菌种经扩繁后接种于原植物，通过干旱胁迫处理观测植物生长、生理等性状，鉴定是否属于高效菌种。本发明可以快速筛选获得当地土著优势菌种，并通过进一步验证得到高效菌种，从而增强岩溶区植物抗旱性。

主权项

1.丛枝菌根真菌高效菌种快速筛选与鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、在夏季炎热干旱时，采集岩溶区不同类型植物根围土壤样品，并迅速冷冻；S2、利用土壤基因组DNA提取试剂盒快速提取样品DNA，随后用丛枝菌根真菌两对引物AML1‑AML2和NS31‑AM1进行巢式PCR扩增，并用琼脂糖凝胶电泳和荧光定量系统检测扩增产物；S3、通过第二代高通量测序手段对PCR扩增产物进行测序，获得土壤中不同科属丛枝菌根真菌；S4、利用生物群落相关指数筛选获得土著丛枝菌根真菌优势菌种；S5、通过显微镜分离出上述土著丛枝菌根真菌优势菌种的孢子，并进一步利用盆栽试验将孢子放入适量的河沙中并借助三叶草和玉米作为寄主扩繁出各优势菌种；S6、将上述扩繁的优势菌种接种于灭菌土壤，并撒播或移栽所需植物，正常培养数月后，做干旱胁迫处理及胁迫后复水处理，在不同处理阶段注意观测植物生长状况；S7、根据上述所观测的植物生长状况结果，将干旱胁迫与复水处理后，植物长势表现依旧较好的菌种鉴定为高效菌种。