[发明专利]一种重组蛋白P35的制备方法有效
| 申请号： | 201810375550.X | 申请日： | 2016-12-26 |
| 公开（公告）号： | CN108531497B | 公开（公告）日： | 2021-06-15 |
| 发明（设计）人： | 刘志杰;殷宏;王振国;杨吉飞;牛庆丽;罗建勋;关贵全 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/31;G01N33/569 |
| 代理公司： | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人： | 张晋 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： |
本发明涉及一种检测羊无浆体（ |
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| 搜索关键词： | 一种 重组 蛋白 p35 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种重组蛋白P35的制备方法，其特征在于：正向引物SEQ No. 2，反向引物SEQ No. 3，以A. ovis全基因组为模板扩增出P35基因，长度为897bp的片段，将前述扩增片段与pGEM‑T Easy Vector 连接，转化感受态DH5a大肠杆菌，筛选阳性且测序正确的克隆菌株提取重组质粒，再将质粒pET30a和pGEM‑P35分别用内切酶EcoR I和Hind Ⅲ双酶切，分别回收目的DNA片段和pET30a载体片段，再连接、转化感受态BL21(DE3)大肠杆菌，筛选阳性克隆菌株，用终浓度1 mMol/L的IPTG进行诱导表达，表达产物经纯化后得到重组蛋白。
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