[发明专利]一种甘蔗中草甘膦及其代谢物的检测方法

摘要

本发明涉及甘蔗中草甘膦及其代谢物的定量检测，提出一种甘蔗中草甘膦及其代谢物的高效液相色谱串联质谱检测方法，其包括步骤：(1)制备标准溶液并进行高效液相色谱串联质谱检测，得不同浓度的混合标准溶液的标准谱图；(2)将步骤1获得的标准谱图按草甘膦及其代谢物品种分别制作浓度与色谱峰面积关系曲线图；(3)甘蔗样品的预处理及高效液相色谱串联质谱检测；(4)样品中的草甘膦及其代谢物的含量的确定，将步骤3中获得的样品谱图的保留时间确定草甘膦及其代谢物品种并将其色谱峰面积与步骤2中得到的标准曲线比对，用插入法确定草甘膦及其代谢物含量。采用本发明具有前处理过程简单，检测速度快，检测结果准确、灵敏度高的特点。

主权项

1.一种甘蔗中草甘膦及其代谢物的检测方法，包括以下步骤：(1)制备标准溶液并进行高效液相色谱串联质谱检测称取各种草甘膦及其代谢物标准品并将其配成混合标准储备液，再将混合标准储备液用乙腈水逐级稀释，同时加入草甘膦内标C13‑PMG溶液，分别配成至少5种不同浓度的混合标准溶液，将不同浓度的混合标准溶液进行高效液相色谱串联质谱检测并得到标准谱图，标准谱图中保留时间确定草甘膦及其代谢物品种，色谱峰面积与对应的草甘膦及其代谢物浓度成函数关系；(2)将步骤1获得的标准谱图按草甘膦及其代谢物品种分别制作浓度与色谱峰面积关系曲线图；(3)甘蔗样品的预处理及高效液相色谱串联质谱检测称取甘蔗样品，加入内标C13‑PMG溶液，加入乙腈水溶液，涡旋振荡后，超声提取，离心，取上清液过滤膜，取滤液进行高效液相色谱串联质谱检测，得样品谱图；(4)样品中的草甘膦及其代谢物的含量的确定将步骤3中获得的样品谱图的保留时间确定草甘膦及其代谢物品种并将其色谱峰面积与步骤2对应的草甘膦及其代谢物品种的标准曲线进行比对，用插入法确定样品中的各草甘膦及其代谢物的含量；其中，在步骤1和3中高效液相色谱串联质谱的检测条件为：色谱条件：a)色谱柱：XBridge Amide，3.5μm，4.6×150mm；b)进样量：5μL；c)柱温：40℃；d)流速：0.4mL/min；e)流动相和洗脱时间：流动相A：5mmol乙酸铵含0.10％氨水；流动相B：乙腈洗脱时间0‑3min，流动相A保持80％，流动相B保持20％；洗脱时间3‑3.5min，流动相A从80％到10％，流动相B从20％到90％；洗脱时间3.5‑4min，流动相A保持10％，流动相B保持90％；洗脱时间4‑4.1min，流动相A从10％到80％，流动相B从90％到20％；洗脱时间4.1‑6min，流动相A保持80％，流动相B保持20％质谱条件：a)电离模式：负离子(ESI‑)；b)气帘气压力344.5kPa，碰撞气压力中档，离子喷雾电压4500V，离子源温度550℃，雾化气压力344.5kPa，辅助加热气压力344.5kPa，接口加热器为开；c)扫描模式：多反应检测(MRM)模式。