[发明专利]一种制备硫酸软骨素的新工艺

摘要

本发明公开了一种制备硫酸软骨素的新工艺，其目的在于提供一种工艺简单、CS回收得率高、所得CS成品纯度高、后处理分离便捷且便于回收蛋白副产的新工艺。本发明的主要方案是在核心蛋白水解方案中在酶解体系加入了一定数量的醇酮类极性溶剂，并引入了均匀剂。基于本发明的技术方案，酶解反应转化率高、转化效率快并且所得CS产物具有高纯特征；酶解反应之后对酶解液的后续处理可以简单便捷地实现，尤其是超滤处理的作业效率可以大为提高，且获得更好的分质效果；一方面通过浓缩液体系得到高质量的CS产品，同是也可以通过透过液体系回收得到质量好的副产蛋白产品；工艺路线中不需要进行传统的氧化、除杂操作，整体工艺的反应条件温和，操作规程简便易行。

主权项

1.一种制备硫酸软骨素的新工艺，其特征在于其由如下步骤来实现：（1）水煮蒸煮： 软骨原料加水浸没，升温至80‑100℃ 进行水煮，使附在软骨表面的肌肉组织剥离，捞出软骨；将步骤水煮后软骨放入釜中进行蒸煮，上层油脂收集外售；（2）两级酶解：将步骤（1）所得软骨和纯水以 1:0.5‑1:2 的比例混合；按照软骨重量0.30‑0.60% 的比例加入一级水解酶，按照纯水重量的3‑20%加入均匀剂，按照纯水体积的10‑60%加入醇酮类极性溶剂，于 20‑60℃，pH8.0‑10.0条件下酶解反应1.0‑2.0h；再按照软骨重量0.30‑0.60%的比例加入二级水解酶，于25‑70℃，pH8.0‑11.0条件下酶解反应1.5‑2.5h；（3）过滤和超滤：将步骤（2）所得酶解液调节pH6.0‑8.0后进行过滤，收集滤液，对滤渣进行1‑2次水洗，合并水洗液与滤液再进行超滤膜过滤，超滤后分成浓缩液和透过液；（4）CS的提取：在步骤（3）所得浓缩液中加入醇酮类极性溶液，使得醇酮类极性溶剂的终浓度含量达到60%wt以上，沉降后离心收集沉降物，经真空干燥得到硫酸软骨素成品；（5）副产蛋白的回收：将步骤（3）所得透过液进行蒸发浓缩和喷雾干燥得到副产蛋白；所述一级水解酶为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、猕猴桃蛋白酶中的一种或几种的混合物；所述二级水解酶为胰蛋白酶或者其与脂肪酶、胶原蛋白酶、糖原酶、核酸酶中一种或几种的混合物；所述醇酮类极性溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮中的一种或几种的混合物；所述均匀剂为包括下述物质中的一种或多种的混合物：a、PEG200～10000、丙烯酸类聚合物表面活性剂、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯醚；b、聚乙二醇单油酸酯、聚乙二醇双油酸酯、聚乙二醇单硬脂酸酯、聚乙二醇双硬脂酸酯；c、粘度调节剂，该粘度调节剂的主要成分为含多羟基的聚丙烯酸酯。