[发明专利]利用枯草芽孢杆菌制备细菌素的方法在审
| 申请号： | 201810395857.6 | 申请日： | 2018-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN108715877A | 公开（公告）日： | 2018-10-30 |
| 发明（设计）人： | 晏向华;张金林;马立保;胡军;王新锴;牛耀嵘;侯奇良 | 申请（专利权）人： | 武汉华扬动物药业有限责任公司 |
| 主分类号： | C12P21/00 | 分类号： | C12P21/00;C12R1/125 |
| 代理公司： | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人： | 冯超;赵龙骧 |
| 地址： | 430205 湖北省武汉市东*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开一种利用枯草芽孢杆菌制备细菌素的方法，该方法首先将枯草芽孢杆菌接于LA固体培养基上培养，得到单菌落；然后将挑取单菌落接种于LB液体培养基中培养，至菌株对数生长中期，得到种子液；然后将种子液接入灭菌后的产细菌素培养基中培养发酵，得到发酵液，最后微滤膜去除菌体，添加硫酸铵使发酵液饱和度为30％，沉淀培养液，离心再用PBS溶解沉淀，得到细菌素粗提液；对细菌素粗提液进行冷冻干燥，得到细菌素。本发明制得的细菌素在4℃条件下可以长期存放，在存放30天后，抗菌效价与最初制备时无显著差异。其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、鼠氏伤寒沙门氏菌、猪链球菌有明显的抑菌效果。 | ||
| 搜索关键词： | 细菌素 枯草芽孢杆菌 制备 粗提液 单菌落 发酵液 沉淀 饱和度 培养液 金黄色葡萄球菌 对数生长中期 伤寒沙门氏菌 大肠杆菌 硫酸铵 固体培养基 种子液接入 长期存放 培养发酵 显著差异 猪链球菌 培养基 微滤膜 种子液 灭菌 菌体 菌株 抗菌 去除 效价 抑菌 接种 溶解 | ||
【主权项】：
1.一种利用枯草芽孢杆菌制备细菌素的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)菌种活化：将枯草芽孢杆菌接于LA固体培养基上培养，得到单菌落；2)种子液制备：将挑取单菌落接种于LB液体培养基中培养，至菌株对数生长中期，得到种子液；3)液体摇瓶发酵：将种子液接入灭菌后的产细菌素培养基中培养发酵，得到发酵液，其中，种子液的接种量为0.5～2％；4)细菌素粗提：微滤膜去除菌体，添加硫酸铵使发酵液饱和度为30％，沉淀培养液，离心，再用PBS溶解沉淀，得到细菌素粗提液；5)对细菌素粗提液进行冷冻干燥，得到细菌素。
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