[发明专利]一种实时荧光PCR检测下呼吸道细菌特异性基因的引物、探针、方法及试剂盒

摘要

本发明涉及分子生物学技术领域，公开了一种实时荧光PCR检测下呼吸道细菌特异性基因的引物、探针、方法及试剂盒，本发明通过采用Taqman探针实时荧光PCR法，分别针对对分枝杆菌16S、金黄色葡萄球菌femA、肺炎克雷伯菌phoE、肺炎链球菌ply、嗜麦芽寡养单胞菌Sm16S、枸橼酸菌cfa、阴沟肠杆菌ampC、流感嗜血杆菌ompP6基因，设计引物、探针、PCR检测混合液，选用荧光PCR仪上的FAM通道进行扩增，通过荧光信号的变化实现目的基因的检测。本发明具有准确率高、特异性强、灵敏度高的特点，能够对多种下呼吸道特异性基因进行快速、准确检测。

主权项

1.一种实时荧光PCR检测下呼吸道细菌特异性基因的引物和探针，其特征在于，检测分枝杆菌基因特异性基因16S rDNA的引物核苷酸序列如SEQIDNO：2～3所示，检测分枝杆菌基因特异性基因16S rDNA的Taqman探针的核苷酸序列如SEQIDNO：4所示；检测金黄色葡萄球菌基因特异性基因femA的引物核苷酸序列如SEQIDNO：6～7所示，检测检测金黄色葡萄球菌基因特异性基因femA的Taqman探针的核苷酸序列如SEQIDNO：8所示；检测肺炎克雷伯菌基因特异性基因phoE的引物核苷酸序列如SEQIDNO：10～11所示，检测肺炎克雷伯菌基因特异性基因phoE的Taqman探针的核苷酸序列如SEQIDNO：12所示；检测肺炎链球菌基因特异性基因ply的引物核苷酸序列如SEQIDNO：14～15所示，检测肺炎链球菌基因特异性基因ply的Taqman探针的核苷酸序列如SEQIDNO：16所示；检测嗜麦芽寡养单胞菌基因特异性基因Sm16S的引物核苷酸序列如SEQIDNO：18～19所示，检测嗜麦芽寡养单胞菌基因特异性基因Sm16S的Taqman探针的核苷酸序列如SEQIDNO：20所示；检测枸橼酸菌基因特异性基因cfa的引物核苷酸序列如SEQIDNO：22～23所示，检测枸橼酸菌基因特异性基因cfa的Taqman探针的核苷酸序列如SEQIDNO：24所示；检测阴沟肠杆菌基因特异性基因ampC的引物核苷酸序列如SEQIDNO：26～27所示，检测阴沟肠杆菌基因特异性基因ampC的Taqman探针的核苷酸序列如SEQIDNO：28所示；检测流感嗜血杆菌基因特异性基因ompP6的引物核苷酸序列如SEQIDNO：30～31所示，检测流感嗜血杆菌基因特异性基因ompP6的Taqman探针的核苷酸序列如SEQIDNO：32所示。