[发明专利]一种快速提取棉花纤维DNA的方法及其应用在审
| 申请号： | 201810401271.6 | 申请日： | 2018-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN108546701A | 公开（公告）日： | 2018-09-18 |
| 发明（设计）人： | 马磊;田新权;徐双娇;方丹;时萌 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院棉花研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 夏艳 |
| 地址： | 455000 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速提取棉花纤维DNA的方法及其应用，本发明选用棉花纤维作为DNA提取材料，经打碎后在裂解液中裂解，经过多次离心、沉淀，提取得到棉花纤维DNA。该方法操作简单，可快速进行批量DNA提取，耗时少，并以所获得的纤维DNA作为模板，对特定基因进行了常规PCR扩增，结果表明所提取的纤维DNA可满足于常规PCR和SSR分子标记PCR扩增。基于上述特性，通过提取成熟棉纤维DNA，可为棉花重要农艺性状基因的分子标记辅助选择育种提供可行的方法，同时在棉花品种溯源方面研究也具有较好的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 棉花纤维 快速提取 常规PCR 纤维 分子标记辅助选择 应用 重要农艺性状 多次离心 棉花品种 基因 裂解液 棉纤维 扩增 裂解 打碎 溯源 沉淀 耗时 育种 棉花 成熟 研究 | ||
【主权项】：
1.一种快速提取棉花纤维DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将棉花纤维充分剪碎后用液氮研磨；2)加入细胞裂解液充分混合，水浴30分钟；3)加入等体积抽提液离心后，取上清加入‑20℃预冷异丙醇，缓慢颠倒离心管直至有沉淀析出，‑20℃静置20分钟；4)离心弃掉上清液；5)加入70％乙醇水溶液，离心弃掉上清液，重复2～3次；6)加入无水乙醇离心，弃掉废液，室温晾置；7)加入无菌水，4℃保存。
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