[发明专利]大片段基因组的捕获探针的制备方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201810403576.0 | 申请日： | 2018-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN108676847A | 公开（公告）日： | 2018-10-19 |
| 发明（设计）人： | 杨吉元;杨骁 | 申请（专利权）人： | 深圳人体密码基因科技有限公司;上海何因生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6811 | 分类号： | C12Q1/6811 |
| 代理公司： | 深圳舍穆专利代理事务所(特殊普通合伙) 44398 | 代理人： | 黄贤炬 |
| 地址： | 518057 广东省深圳市南山区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种大片段区域基因组的捕获探针的制备方法，其包括：设计PCR引物对待捕获基因组进行PCR反应扩增；将在PCR反应中所产生的PCR产物混合成混合物，并将混合物破碎成规定片段；在规定片段的两端接上含有RNA聚合酶识别序列的接头，构建成文库；使用RNA聚合酶将所得到的文库中的片段转录成RNA产物；加入DNA消化酶，将RNA产物中的DNA链消化；并且消化后的产物经纯化处理，得到捕获的基因探针。在本发明中，采用将待捕获区域基因的扩增产物破碎成规定片段，经过后续反应得到适合长度的基因探针(RNA探针)。这个长度范围的RNA不易自我退火形成二级结构，使用探针时结合效率较高。由此，能够在确保特异性的同时具有更好的容错性，实现了更高的灵敏度。 | ||
| 搜索关键词： | 捕获探针 基因探针 基因组 制备 文库 捕获 破碎 退火 大片段基因组 混合成混合物 消化 转录 捕获区域 纯化处理 二级结构 扩增产物 混合物 灵敏度 容错性 试剂盒 构建 扩增 探针 大片 基因 | ||
【主权项】：
1.一种大片段基因组的捕获探针的制备方法，其特征在于，包括：设计PCR引物对待捕获基因组进行PCR反应扩增；将在PCR反应中所产生的PCR产物混合成混合物，并将所述混合物破碎成规定片段；在所述规定片段的两端接上含有RNA聚合酶可识别启动子序列的接头，构建成文库；使用RNA聚合酶将所得到的所述文库中的片段转录成RNA产物；加入DNA消化酶，将所述RNA产物中的DNA链消化；并且消化后的产物经纯化处理，得到捕获的基因探针。
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