[发明专利]鹰嘴豆中性多糖CWP2-1和CWP2-2的制备方法

摘要

本发明公开了鹰嘴豆中性多糖CWP2‑1和CWP2‑2的制备方法，包括以下步骤：1)取鹰嘴豆粉碎过筛，除脂离心，残渣烘干加入蒸馏水，搅拌离心，收集上清；2)将浓缩的上清除淀粉，脱蛋白，透析脱盐，分级醇沉，冻干，得粗多糖；3)将粗多糖用蒸馏水溶解，离心，上清液上柱梯度洗脱，收集目的洗脱液冻干；4)将目的洗脱液上柱，洗脱，收集洗脱峰，即纯化的鹰嘴豆中性多糖。本发明得到具有抗氧化活性和免疫调节活性的鹰嘴豆中性多糖，其能使DPPH和ABTS自由基清除活性增强，金属还原能力增强；而且该多糖能够刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞产生NO、MCP‑1、TNF‑α和IL‑6因子，经超声处理后多糖功效更强。

主权项

1.一种鹰嘴豆中性多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)取清洗干净的鹰嘴豆，粉碎过60目筛，95％乙醇浸泡3d除脂，离心，收集残渣烘干，加入蒸馏水，离心，收集上清液并浓缩；2)将步骤1)得到的浓缩的上清液用α‑淀粉酶法除淀粉，Sevag法进行脱蛋白处理，再装入透析袋4℃过夜透析脱盐，分级醇沉，冻干，得两种鹰嘴豆粗多糖；3)将步骤2)得到的两种鹰嘴豆粗多糖用蒸馏水溶解，13000r/min离心20min，上清液进行阴离子交换层析，梯度洗脱后，490nm紫外检测，合并收集洗脱液，两种粗多糖均收集得到两个主峰；4)将步骤3)得到的目的洗脱液分别进行凝胶过滤层析，等度洗脱后，在206nm紫外检测，分别收集得到两个目的洗脱峰，即纯化的鹰嘴豆中性多糖。