[发明专利]一种快速检测肝素和/或低分子肝素中肝素二糖含量的方法在审
| 申请号： | 201810413400.3 | 申请日： | 2018-05-03 |
| 公开（公告）号： | CN108318602A | 公开（公告）日： | 2018-07-24 |
| 发明（设计）人： | 张在忠;郭林;陈少鹏;马向明;王秀萍 | 申请（专利权）人： | 东营天东制药有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 张雪娇;赵青朵 |
| 地址： | 257000 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种快速检测肝素和/或低分子肝素中肝素二糖含量的方法，包括：S1)将肝素和/或低分子肝素溶液与肝素酶混合反应，得到酶解产物；S2)将所述酶解产物利用反相离子对色谱进行检测，记录HPLC谱图；所述反相离子对色谱的流动相包括流动相A与流动相B；所述流动相A为包含反相离子对的有机溶剂与水的混合溶液；所述流动相B为包含反相离子对、碱金属氯盐的有机溶剂与水的混合溶液；所述反相离子对为季铵盐。与现有技术相比，本发明通过肝素酶将肝素和/或低分子肝素完全降解得到主要的肝素二糖组成和/或小片段如三糖、四糖单元，通过反相离子对试剂结合反相色谱能被快速分离并定量分析，且该方法具有很好的耐久性和重复性。 | ||
| 搜索关键词： | 流动相 低分子肝素 反相 肝素 肝素二糖 离子 反相离子对色谱 混合溶液 快速检测 酶解产物 有机溶剂 肝素酶 碱金属氯盐 离子对试剂 定量分析 反相色谱 混合反应 快速分离 季铵盐 小片段 降解 三糖 四糖 检测 记录 | ||
【主权项】：
1.一种快速检测肝素和/或低分子肝素中肝素二糖含量的方法，其特征在于，包括：S1)将肝素和/或低分子肝素溶液与肝素酶混合反应，得到酶解产物；所述肝素酶为肝素酶I、肝素酶II与肝素酶III的混合物或肝素酶II；S2)将所述酶解产物利用反相离子对色谱进行检测，记录HPLC谱图；所述反相离子对色谱的流动相包括流动相A与流动相B；所述流动相A为包含反相离子对的有机溶剂与水的混合溶液；所述流动相B为包含反相离子对、碱金属氯盐的有机溶剂与水的混合溶液；所述反相离子对为季铵盐。
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