[发明专利]葱属主要蔬菜作物叶绿体DNA提取方法及其质量评价体系的建立有效

专利信息
申请号: 201810421963.7 申请日: 2018-05-04
公开(公告)号: CN108531477B 公开(公告)日: 2020-07-14
发明(设计)人: 霍雨猛;吴雄;杨妍妍;刘冰江;高莉敏;孔素萍;杨宁;孙雨晴 申请(专利权)人: 山东省农业科学院蔬菜花卉研究所
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12N15/11;C12Q1/6895
代理公司: 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 代理人: 王志坤
地址: 250100 山东*** 国省代码: 山东;37
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明公开一种葱属主要蔬菜作物叶绿体DNA提取方法及其质量评价体系的建立,通过采用试剂优化后的高盐低pH值法,与蔗糖DNase法对比,对他们进行叶绿体DNA提取测试,结果表明,高盐低pH法优于蔗糖DNase法。此外,通过叶绿体DNA含量的荧光定量比值评价体系,评估了高盐低pH法和蔗糖DNase法对大葱叶绿体DNA含量提取效果,随后我们用高盐低pH法对葱属蔬菜作物的洋葱、大蒜和韭菜进行了测试,获得了预期的效果。本发明的DNA提取方法DNA产率高;纯度高,没有多糖、蛋白质等杂质的污染;叶绿体DNA的含量高,为进一步提取无核污染的高纯度叶绿体DNA以及细胞器全基因组测序奠定了基础。
搜索关键词: 葱属 主要 蔬菜 作物 叶绿体 dna 提取 方法 及其 质量 评价 体系 建立
【主权项】:
1.一种葱属主要蔬菜作物叶绿体DNA提取方法,其特征在于:(1)将新鲜叶片黑暗处理后洗净、剪碎,放入匀浆器内并加入Buffer I匀浆;(2)过滤匀浆,离心;(3)上述离心所得上清液过滤,再离心,弃上清,保留沉淀,即得粗体叶绿体;(4)沉淀中加入Buffer II,悬浮定容,离心,保留沉淀。(5)沉淀中加入Buffer III,悬浮,离心,保留沉淀,即为纯化的叶绿体;所述Buffer I(pH 3.8):0.5‑2mol/L NaCl,0.25mol/L ascorbic acid,10mmol/L sodium metabisulfite,0.0125mol/L Borax,50mmol/L Tris‑HCl(pH 8.0),7mmol/L EDTA,1%PVP‑40,0.1%BSA;所述Buffer II(pH 8.0):0.5‑2mol/L NaCl,0.0125mol/L Borax,1%PVP‑MatK40,50mmol/L Tris‑HCl(PH 8.0),25mmol/L EDTA,0.1%BSA;所述Buffer III:0.5‑2mol/L NaCl,100mmol/L Tris‑HCl(PH 8.0),50mmol/L EDTA,10mmol/Lβ‑Me。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东省农业科学院蔬菜花卉研究所,未经山东省农业科学院蔬菜花卉研究所许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201810421963.7/,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top