[发明专利]一种单细胞基因表达量检测文库的构建方法在审
| 申请号： | 201810423698.6 | 申请日： | 2018-05-06 |
| 公开（公告）号： | CN108611346A | 公开（公告）日： | 2018-10-02 |
| 发明（设计）人： | 沈欢;唐琼;陆利;秦闯华;鞠魏;唐薇;朱虎;徐根明;潘艺;赵谦 | 申请（专利权）人： | 湖南大地同年生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C40B50/06 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 410205 湖南省长*** | 国省代码： | 湖南;43 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种单细胞基因表达量检测文库的构建方法。本发明以单个细胞中少至pg级别的RNA作为起始量，采用链特异性和转座结合的方式构建文库，对特定细胞的特定基因的表达量进行检测，从而把基因测序应用到了单个细胞层面。本发明可应用于不同类型的测序平台，文库构建起始量极低，为单个细胞的核酸量，可以针对单个细胞进行基因表达量的研究。 | ||
| 搜索关键词： | 单个细胞 文库 基因表达量检测 起始量 构建 生物技术领域 基因表达量 测序平台 方式构建 基因测序 链特异性 文库构建 表达量 核酸量 转座 应用 细胞 基因 检测 研究 | ||
【主权项】：
1.一种单细胞基因表达量检测文库的构建方法，其特征在于按照以下步骤进行：(1)通过流式细胞仪分拣出单个细胞，置于Lysis Buffer缓冲液中；(2)在含有单细胞的Lysis Buffer缓冲液中直接加入第一链合成所需逆转录组分，逆转录合成First‑Strand cDNA；(3)在步骤(2)后直接在上步体系中加入扩增体系；(4)在步骤(3)后加入磁珠进行PCR产物纯化；(5)在步骤(4)后加入转座体系，进行转座和加接头；(6)在步骤(5)后对转座产物进行纯化；(7)在步骤(6)后加入PCR扩增体系，进行文库的放大；(8)在步骤(7)后加入磁珠对扩增后的文库进行纯化，纯化后的产物即为上机文库。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于湖南大地同年生物科技有限公司，未经湖南大地同年生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810423698.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
