[发明专利]一种多梯度载药浓度人工骨支架的制备方法

摘要

本发明提出一种多梯度载药浓度人工骨支架的制备方法，通过将不同载药浓度的丝素微球粉末分别同生物胶混合后，将粘稠状液体分别加入到生物三维挤压成型机不同的储液腔中，以羟基磷灰石为主要原材料，通过预先导入的三维模型，层层打印出所需的多梯度载药浓度人工骨支架。本次发明提供的人工骨支架制备方法可以根据病患的自身需求，采用多梯度浓度药物的配置，使人工骨中的药物释放的更加平缓，增加药物有效浓度释放的时间，还可以将多梯度浓度的药物有选择的喷洒在人工骨的特定部位，实现药物在伤口处的靶向作用。

主权项

1.一种多梯度载药浓度人工骨支架的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1：按照摩尔比8：2：1配置氯化钙‑乙醇‑水三元溶液；获取丝素蛋白，并按照三元溶液与丝素蛋白质量比为10：1进行配比；将丝素蛋白置于三元溶液中，并于80℃下搅拌溶解至少30min，得到混合溶液；将冷却后的混合溶液装入透析袋，在蒸馏水中透析至少3天以除去氯化钙，再经过滤获得丝素溶液；步骤2：按万古霉素与丝素蛋白质量比分为1:10、1:20、1:30将万古霉素加入丝素溶液中，在常温下搅拌至少30min，获得三种不同浓度的载药丝素溶液；步骤3：向容器中加入乙酸乙酯，并按体积比乙酸乙酯：Span80＝50:1向容器中加入适量的Span80，常温下将二者搅拌混合至少15min后，调节搅拌器转速至600～700rpm，并按体积比乙酸乙酯：丝素溶液＝50:1将适量的丝素溶液以0.4ml/min的速度逐滴滴入搅拌的混合溶液中，持续搅拌至少2h，得到含有载药微球的悬浮液；步骤4：重复步骤3，得到三种不同浓度的载药微球悬浮液；对载药微球悬浮液用石油醚、异丙醇和乙醇依次洗涤三次，通过冷冻干燥机在‑50℃条件下冻干12h，收集三种不同浓度的载药微球；步骤5：将步骤4得到的三种不同浓度的载药微球分别与生物胶水按体积比5:1混合后得到三种粘稠状混合物，再分别加入4.0％胶水体积的固化促进剂聚酰胺和6.0％胶水体积的增塑剂PBMA，混合均匀后分别加入到3D挤压成型机的储液腔A、B和C中；步骤6：将粒径为100±10nm大小的羟基磷灰石颗粒与粒径为100±30μm的聚己内酯颗粒按照质量比为1:4制得混合材料；步骤7：建立人工骨支架三维模型，并对三维模型进行分层切片处理，获取分层截面数据；向分层截面数据中导入对应的载药浓度梯度数据；步骤8：在成型工作台上均匀的铺上一层步骤6制备的混合材料；按照步骤7中的分层截面数据和载药浓度梯度数据，控制3D挤压成型机中对应三种不同载药浓度的喷头将步骤5中制备的三种载药生物胶水喷洒到混合材料上，生物胶水平均用量为0.0004ml/mm2；步骤9：重复步骤8，直至所有分层打印完毕，支架制作完成；取出支架，对支架进行强化、打磨处理。