[发明专利]一种香水百合组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种香水百合组织培养快速繁殖方法，其特征在于包括以下步骤：(1)外植体的取材与消毒；(2)无菌株的获取；(3)脱分化及分化培养；(4)炼苗移栽。与现有技术相比，本发明技术方案的有益效果是：本发明通过生物技术对香水百合进行组织培养快速繁殖，在短时间内培育出大量可供大田栽培的香水百合种苗，显著提高了香水百合种苗的繁殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。

主权项

1.一种香水百合组织培养快速繁殖方法，其特征在于包括以下步骤：(1)外植体的取材与消毒：香水百合叶片作为外植体进行消毒，首先将3‑5滴洗洁精滴入装有50ml自来水的烧杯中，把外植体放入烧杯轻轻搅拌5min，再用棉花清洗外植体表面污垢，自来水轻微流水冲洗20‑30min；移置超净工作台，用75v/v％乙醇浸泡30s，无菌水冲洗一遍，然后再用添加了1‑2滴吐温‑20的50ml浓度为0.1v/v％升汞消毒1‑2min、无菌水冲洗3‑5次，获得无菌外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；(2)无菌株的获取：将消毒好的外植体置于诱导培养基中进行不定芽诱导，发芽得到无菌株，所述诱导培养基是以1/2MS为基本培养基，添加5g·L‑1琼脂，20g·L‑1蔗糖，1.5mg·L‑1的6‑苄基腺嘌呤，0.3mg·L‑1的萘乙酸，培养基pH值为6.8，培养条件为：温度为25‑27℃，光照强度1500‑2000lux，光照时间为10‑12h/d，培养时间为15‑20d；(3)脱分化及分化培养：切取2‑3cm的无菌株置于添加5g·L‑1琼脂，25g·L‑1蔗糖，1.0‑2.0mg·L‑1的6‑苄基腺嘌呤、0.1‑0.5mg·L‑1的激动素(KT)、0.1‑0.5mg·L‑1的萘乙酸、葡萄汁100‑200g·L‑1的1/2MS培养基中培养获得，培养基pH值为6.8，培养条件为：温度为25‑27℃，光照强度1500‑2000lux，光照时间为10‑12h/d，培养时间为20d；(4)炼苗移栽：进行炼苗后移植于基质中培养，先移栽至大棚7天，再移栽至大田。