[发明专利]一种用于制备手性苯基乙二醇的环氧化物水解酶的制备方法在审
| 申请号： | 201810443452.5 | 申请日： | 2018-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN108588051A | 公开（公告）日： | 2018-09-28 |
| 发明（设计）人： | 金火喜;张千伟;徐红萍 | 申请（专利权）人： | 浙江海洋大学 |
| 主分类号： | C12N9/14 | 分类号： | C12N9/14;C12P7/22 |
| 代理公司： | 杭州九洲专利事务所有限公司 33101 | 代理人： | 翁霁明 |
| 地址： | 316022 浙江省舟*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 一种用于制备手性苯基乙二醇的环氧化物水解酶的制备方法，它是以来自微生物Agromyces mediolanus的环氧化物水解酶氨基酸序列为模板，在NCBI等数据库中进行基于挖掘，将获得的基因克隆到大肠杆菌、酵母或枯草芽孢杆菌中进行表达；然后以苯基环氧乙烷为反应底物，利用重组大肠杆菌静息细胞进行催化，检测产物苯基乙二醇的对映体过量值，从而筛选获得新型环氧化物水解酶，用于制备手性纯的苯基乙二醇；具体是：将SEQ ID NO.1所示的环氧化物水解酶表达至大肠杆菌、酵母或枯草芽孢杆菌中，培养菌体细胞，以200～280U/g苯基环氧乙烷反应底物的添加量加入所述细胞，并在pH为6～8的有机相中进行催化，获得手性纯的苯基乙二醇。 | ||
| 搜索关键词： | 环氧化物水解酶 苯基乙二醇 制备手性 苯基环氧乙烷 枯草芽孢杆菌 大肠杆菌 反应底物 酵母 催化 制备 重组大肠杆菌 氨基酸序 基因克隆 静息细胞 菌体细胞 有机相中 对映体 添加量 手性 微生物 数据库 筛选 细胞 挖掘 检测 | ||
【主权项】：
1.一种用于制备手性苯基乙二醇的环氧化物水解酶的制备方法，其特征在于：以来自微生物Agromyces mediolanus的环氧化物水解酶氨基酸序列为模板，在NCBI等数据库中进行基于挖掘，将获得的基因克隆到大肠杆菌、酵母或枯草芽孢杆菌中进行表达；然后以苯基环氧乙烷为反应底物，利用重组大肠杆菌静息细胞进行催化，检测产物苯基乙二醇的对映体过量值，从而筛选获得新型环氧化物水解酶，用于制备手性纯的苯基乙二醇。
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