[发明专利]基于适体的多重测定

摘要

本公开描述了用于检测测试样品中可能存在的一种或多种靶分子的方法、装置、试剂和试剂盒。所描述的方法、装置、试剂盒和试剂有助于通过对核酸(即，适体)进行检测和定量来对测试样品中的非核酸靶标(例如，蛋白质靶标)进行检测和定量，其中显著减少或消除适体‑适体相互作用，同时维持适体‑靶标相互作用。

主权项

1.一种试剂盒，其包含：a).一种或多种适体，其中所述一种或多种适体中的每种对一种或多种靶标具有特异性；b).一种或多种固体支持物；c).一种或多种分隔试剂；d).一种或多种用于从适体‑靶标亲和复合物释放适体的试剂；e).一种或多种包含有机溶剂的缓冲溶液；和f).一种或多种包含离液盐的缓冲溶液，其中所述一或多种缓冲溶液的pH是中性的，且其中所述试剂盒用于实施包括以下步骤的方法：i.将适体暴露于第一固体支持物，其中所述适体包含第一标签且所述第一固体支持物包含第一捕获元件，且其中所述第一标签对所述第一捕获元件具有亲和力，ii.允许所述第一标签与所述第一捕获元件缔合；iii.用一种或多种解离聚集的适体的溶液来洗涤所述第一固体支持物；iv.使所述适体与测试样品接触，其中如果所述测试样品中存在靶分子，则形成适体‑靶标亲和复合物；v.去除未与所述第一固体支持物缔合的一种或多种组分；vi.将第二标签连接到所述适体‑靶标亲和复合物中的所述靶分子，其中所述第二标签对第二捕获元件具有亲和力；vii.从所述第一固体支持物释放所述适体‑靶标亲和复合物；viii.将所述释放的适体‑靶标亲和复合物暴露于包含所述第二捕获元件的第二固体支持物，并且允许所述第二标签与所述第二捕获元件缔合；ix.去除未与所述第二固体支持物缔合的一种或多种组分；和x.用一种或多种包含离液盐的缓冲溶液从所述第二固体支持物洗脱所述适体，或其中所述试剂盒用于实施包括以下步骤的方法：i.使被固定于第一固体支持物上并用一种或多种解离聚集的适体的溶液洗涤的适体与测试样品接触，其中如果所述测试样品中存在靶分子，则形成适体‑靶标亲和复合物，且其中所述第一固体支持物包含第一捕获元件且其中所述适体包含对所述第一捕获元件具有亲和力的第一标签；ii.去除未与所述第一固体支持物缔合的一种或多种组分；iii.将第二标签连接到所述适体‑靶标亲和复合物中的所述靶分子，其中所述第二标签对第二捕获元件具有亲和力；iv.从所述第一固体支持物释放所述适体‑靶标亲和复合物；v.将所述释放的适体‑靶标亲和复合物暴露于包含所述第二捕获元件的第二固体支持物，并且允许所述第二标签与所述第二捕获元件缔合；vi.去除未与所述第二固体支持物缔合的一种或多种组分；和vii.用一种或多种包含离液盐的溶液从所述第二固体支持物洗脱所述适体。